丹參制劑及桑白皮的抗氧化藥效評價.pdf

1、自由基醫(yī)學理論認為疾病的發(fā)生是自由基過剩引起的,它為人們對發(fā)病的機理和疾病的認識開辟了一條新的道路,這對于目前難以攻克疾病的治療新方法的探討具有重要指導意義。因此研究具有高度抗氧化活性的抗氧化劑和開發(fā)針對自由基失衡問題的抗氧化新藥物具有重大意義。過去對于藥物好壞評價的傳統(tǒng)方法是看藥物中含有某一種或某一類有效成分的多少。但是對于像抗氧化類中藥和中藥制劑而言,藥物抗氧化效果與其中有效成分含量不一定是正相關,且各成分間相互作用復雜,導致該方法

2、不能準確反映藥物的實際治療效果。
　　本文在自由基醫(yī)學的理論基礎上,結合藥物藥效評價理論,針對治療氧化損傷類疾病的藥物,提出基于抗氧化效果的藥效評價的新觀點。
　　論文分兩個部分,第一部分是方法學研究,建立3種基于自由基清除能力的抗氧化評價體系并對各種實驗參數(shù)進行優(yōu)化。第二部分是方法的應用研究,將方法應用于藥物體系的評價,站在抗氧化角度,對8種丹參類上市藥物和2種中藥提取物進行評價。
　　3種抗氧化評價方法分別為:紫外

3、檢測DPPH法;采用流動注射化學發(fā)光檢測H2O2-Fe2+- Luminol的·OH法、鄰苯三酚-Luminol-碳酸鹽的·O2-法。通過單因素變量法優(yōu)化了實驗參數(shù)并對優(yōu)化后方法的穩(wěn)定性和精密度進行了考察,證明三種方法穩(wěn)定性好精密度高方法準確可靠,可應用于對藥物體系的抗氧化評價。藥物的抗氧化活性可以通過它們對3種自由基的清除能力間接預測,利用自由基清除率與濃度的劑量依賴關系可以求出 IC50值。以 IC50值為評價指標可以科學地表示藥物

4、自由基清除能力,從而反應其抗氧化活性。
　　選擇能力治療心腦血管疾病的8種丹參藥物為研究對象,對其抗氧化治療功效進行了評價。結果顯示3種方法評價結果差異大,可比性不大,測定結果僅能代表各自體系自由基清除能力,單一方法很難準確評價藥物抗氧化能力。結果證明多方法多角度綜合評價的必要性,也說明急需建立標準化評價機制的緊迫性。
　　以桑白皮為研究對象,采用水提醇沉法提取多糖,并采用正交試驗考察了桑白皮多糖的提取工藝,獲得了最佳提取條

5、件為:加水倍數(shù)20倍、超聲時間30 min、提取溫度50℃、提取次數(shù)2次。并對最優(yōu)方案進行驗證,提取樣品200 g得到多糖12.59 g,提取率6.30％,結果令人滿意。用硫酸苯酚法測定總糖含量,DNS比色法測定還原糖含量,兩者之差表示多糖含量。以Vc作為參照評價多糖抗氧化活性,3種自由基清除實驗表明桑白皮多糖對DPPH和·OH清除作用與質(zhì)量濃度劑量相關,結果顯示桑白皮多糖對DPPH自由基和·OH具有一定的抗氧化活性,但不及 Vc。并發(fā)

6、現(xiàn)桑白皮多糖對鄰苯三酚自氧化產(chǎn)生的超氧陰離子促 luminol發(fā)光體系具有增敏作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)該增敏作用與多糖質(zhì)量濃度成線性相關。該發(fā)現(xiàn)有望發(fā)展為多糖的含量測定提供新方法等,具有廣泛應用前景和潛在利用價值。
　　采用95％乙醇浸提桑白皮黃酮,AB-8大孔吸附樹脂富集純化黃酮粗提物,紫外分光光度法測定其含量,并考察其抗氧化活性。結果顯示大孔吸附樹脂處理后的桑白皮黃酮含量可達51％以上。同樣以Vc作為陽性對照測定了桑白皮黃酮對三種