SHR心肌細胞凋亡、心肌纖維化及膠原基因表達的研究.pdf

1、研究目的:該實驗應用與人類原發(fā)性高血壓最接近的動物模型——自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)為實驗對象,觀察高血壓不同階段心肌纖維化、凋亡與增生的動態(tài)演變過程,觀察LVH不同階段Ⅰ、Ⅲ型膠原基因表達,二者與心肌纖維化的關系,為闡明高血壓左室重構的機制提供實驗資料.研究方法:12周齡SHR雄性70只,隨機分為對照組28只、治療組依那普利組和洛沙但組備21只,分別予以依那普利和洛沙但30mg.kg<'-1>.day<'-1>同時設正常對照組WKY組

2、亦為12周齡,共觀察12周.SHR對照組和治療組分別于12、16、20、24周,WKY組分別于12、24周4﹪戊巴比妥鈉腹腔內注射麻醉,取出心臟和胸主動脈(主動脈弓至隔肌)固定,光鏡下HE、Sirius紅染色,電鏡下構(木緣)酸 鉛染色,測量左心室重量,計算左室重量/體重(LV/BW),測量心肌問質膠原容積分數(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA ),測量血管壁厚度、管壁內、外徑;原位未端標記法(TUNEL法)檢測凋亡細胞;SP法

3、檢測增殖細胞核抗原(PCNA);另取左心室心肌組織及主動脈進行勻漿,采用以β- actin為內參照的RT- PCR法測定不同周齡SHR及WKY大鼠左室心肌、主動脈Ⅰ、Ⅲ型膠原基因mRNA的表達.結論:(1)自12至24周齡S HR(即高血壓左室肥厚早、中、晚期)心臟肥厚指數和心肌間質纖維化逐漸增加,SHR組明顯高于WKY組.心肌纖維化從心室肥厚的早期就開始,表明心肌間質纖維化參與了SHR左室重構.應用依那普利和洛沙但治療后,LVH和心肌

4、纖維化明顯下降,兩組間比較無差異,證實ACEI和AngⅡAT<,1>受體桔抗劑均能抑制心肌膠原增生,早期應用能逆轉左室肥厚.(2)高血壓心肌細胞中存在細胞凋亡,且細胞凋亡存在時間窗,12周齡時細胞凋亡接近正常對照組,以后凋亡增加,至20周齡時,細胞凋亡到達最高峰,至24周凋亡明顯減少,表明細胞凋亡參與了高血壓左室重構.(3)心?、裥湍z原基因表達隨年齡而增加,SHR更顯著.(4)SHR主動脈重構呈現(xiàn)血管肥厚的特點,即內、外徑不變,管壁增厚