西樂葆對(duì)鼻咽癌CNE-1細(xì)胞的放射增敏作用.pdf

1、背景：鼻咽癌是我國南方常見的惡性腫瘤，因?yàn)槠浣馄饰恢玫奶厥饧叭菀桌奂帮B底，發(fā)生咽旁及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，其主要的治療手段為放射治療。如何提高其放射敏感性對(duì)于提高鼻咽癌的治療效果具有重要的意義。環(huán)氧化酶(COX)是花生四烯酸合成前列腺素的關(guān)鍵酶，分為結(jié)構(gòu)型COX-1和誘生型COX-2。近來大量研究發(fā)現(xiàn)COX-2在很多腫瘤中為高表達(dá)，并與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。在細(xì)胞及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)COX-2選擇性抑制劑能抑制腫瘤生長，還能增加化療藥物的細(xì)胞

2、毒性作用，與放射治療聯(lián)合應(yīng)用能明顯提高腫瘤的放射敏感性。選擇性COX-2抑制劑作用于鼻咽癌細(xì)胞是否也具有放射增敏作用至今未見有報(bào)道。鼻咽癌的主要治療手段是放射治療。因而探索COX-2選擇性抑制劑對(duì)于鼻咽癌CNE-1細(xì)胞是否有放射增敏作用具有重要意義，直接關(guān)系到鼻咽癌的治療效果，關(guān)系到鼻咽癌患者的生存率。我們首先通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探索COX-2選擇性抑制劑對(duì)鼻咽癌細(xì)胞放射處理的影響，為進(jìn)一步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、臨床實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的：了解C

3、OX-2選擇性抑制劑一西樂葆對(duì)鼻咽癌CNE-1細(xì)胞的抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡作用；西樂葆聯(lián)合放射處理對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響，評(píng)價(jià)COX-2選擇性抑制劑對(duì)CNE-l細(xì)胞的放射增敏作用。并初步探討其增敏作用與不同劑量濃度之間的相關(guān)性。 方法：選擇鼻咽癌CNE-l細(xì)胞系作為試驗(yàn)對(duì)象，檢測(cè)CNE-1細(xì)胞系的COX-2表達(dá)水平，以不同的西樂葆濃度OμM、1.25M、2.50μM、5.00μM設(shè)A、B、C、D四個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別予6MV-X

4、線照射0、2、4、6Gy后，再分別行四唑鹽(MTT)比色試驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)，檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力、克隆形成能力及早、晚期凋亡四項(xiàng)指標(biāo)。 結(jié)果：COX-2在CNE-1、CNE-2細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)；單純照射時(shí)不同輻射劑量對(duì)CNE-1細(xì)胞的細(xì)胞增殖、克隆形成、早、晚期凋亡率有顯著性差異(P

5、顯著，A組與B組之間無顯著差異(P>O.05)，B、C、D組兩兩比較差異顯著，提示1.25μM西樂葆對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖無影響，在2.50-5.00μM之間對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖明顯抑制，且抑制作用隨西樂葆劑量增加而增強(qiáng)，克隆形成及早、晚期凋亡率A組(空白對(duì)照)與B(西樂葆濃度1.25μM)、C(西樂葆濃度2.50μM)、D(西樂葆濃度5.00μM)組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(各P0.05)，B組與D組之

6、間差異顯著(P<0.05)；C、D組之間的差異不明顯(P>0.05)。提示西樂葆對(duì)CNE-1細(xì)胞的克隆形成能力有抑制作用，對(duì)CNE-1細(xì)胞早、晚期凋亡有明顯的誘導(dǎo)作用，其作用與西樂葆濃度存在相關(guān)性，5.00μM較1.25μM西樂葆對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用明顯強(qiáng)，而在1.25μM與2.50μM間、2.50與5.00μM間比較其對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用無明顯差異。西樂葆與不同放射劑量照射聯(lián)合應(yīng)用B、C、D組與A組

7、之間MTT法測(cè)得OD值、克隆形成率、及晚期凋亡率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(各P<0.05)，B組與C、D組之間有顯著性差異(各P<0.05)，C組與D組之間MTT法測(cè)得OD值有顯著差異(P<0.05)，而克隆形成、晚期凋亡率無明顯差異(P>0.05)。各組間的早期凋亡率無明顯差異(P>0.05)，提示西樂葆與放射治療聯(lián)合對(duì)于CNE-1細(xì)胞早期凋亡未表現(xiàn)出協(xié)同作用，而對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)晚期凋亡有協(xié)同作用，并在0-2.50μM間隨西樂葆劑量

8、增加其協(xié)同作用增強(qiáng)，在2.50-5.00μM之間未顯示出明顯的劑量相關(guān)性。 結(jié)論：1、CNE-1、CNE-2鼻咽癌細(xì)胞均為COX-2陽性細(xì)胞。2、西樂葆對(duì)CNE-1細(xì)胞的增殖、克隆形成能力具有抑制作用，并能誘導(dǎo)其早、晚期凋亡。西樂葆能增強(qiáng)放射對(duì)CNE-1細(xì)胞的增殖、克隆形成能力的抑制作用；增強(qiáng)放射誘導(dǎo)的CNE-1細(xì)胞晚期凋亡，從而增加CNE-1細(xì)胞的放射敏感性。3、西樂葆對(duì)CNE-1細(xì)胞的抗腫瘤作用及其對(duì)CNE-1細(xì)胞的放射增敏