美洛昔康對人鼻咽癌CNE-1細胞株作用的研究.pdf

1、目的：初步探討選擇性環(huán)氧酶-2（COX-2）抑制劑美洛昔康（Meloxicam)對培養(yǎng)的人鼻咽癌CNE-1細胞增殖和凋亡的影響及其可能的機制，分析COX-2抑制劑在鼻咽癌化學預防和治療中的應用價值，為今后的動物和臨床研究提供可靠的實驗依據(jù)。
　　方法：選擇CNE-1細胞為研究對象，以不同溶度（0、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L）美洛昔康處理CNE-1細胞不同時間（24h、48h、72h）后，用MTT法觀

2、察不同溶度、不同時間美洛昔康作用下CNE-1細胞的生長變化；將所選擇藥物作用于CNE-1細胞后，用AO+EB染色法、流式細胞儀檢測法測定美洛昔康不同溶度作用下不同時間后細胞的凋亡情況；采用細胞免疫熒光法檢測對照組和不同溶度美洛昔康作用48h后，CNE-1細胞內(nèi)COX-2蛋白的表達情況。
　　結(jié)果：
　　1.MTT比色法結(jié)果顯示：美洛昔康對CNE-1細胞生長有顯著的抑制作用，并且呈現(xiàn)出時間和劑量依賴性；隨藥物濃度加大和作用時間

3、延長，存活細胞數(shù)量逐漸減少，在高溶度400umol/L時，48h后細胞生長抑制率高達50.3％；100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細胞24h，其抑制率分別為8.4%、10.3%、16.4%；100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細胞48h，其抑制率分別為10.4%、28.8%、50.3%；
　　2.AO+EB染色法及流式細胞檢測法結(jié)果顯示：用不

4、同濃度的美洛昔康處理CNE-1細胞后，CNE-1細胞的凋亡率實驗組與對照組相比均表現(xiàn)為不同程度的誘導作用（P<0.05），并且這種誘導作用呈明顯的劑量-時間依賴性。AO+EB染色結(jié)果可見明顯的凋亡細胞存在，凋亡細胞數(shù)在高濃度美洛昔康組明顯增多，400μmol/L溶度組干預48h后，200個細胞凋亡細胞達35±3個，流式細胞儀檢查結(jié)果400μmol/L溶度組處理48h后細胞凋亡率為21.84±0.6%，與對照組有顯著性差異（p<0.05）

5、；
　　3.細胞免疫熒光結(jié)果顯示：CNE-1細胞中COX-2蛋白表達呈陽性率高,美洛昔康作用后,CNE-1細胞中COX-2蛋白陽性的表達受到抑制,美洛昔康濃度越高,其抑制COX-2表達的作用越明顯,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細胞48h后，細胞內(nèi)COX-2蛋白陽性表達率分別為39.61±0.34%、30.82±0.67%、23.03±1.12%，與對照組66.16±1.22%的陽