美洛昔康對人鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:初步探討選擇性環(huán)氧酶-2(COX-2)抑制劑美洛昔康(Meloxicam)對培養(yǎng)的人鼻咽癌CNE-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其可能的機(jī)制,分析COX-2抑制劑在鼻咽癌化學(xué)預(yù)防和治療中的應(yīng)用價值,為今后的動物和臨床研究提供可靠的實驗依據(jù)。
  方法:選擇CNE-1細(xì)胞為研究對象,以不同溶度(0、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L)美洛昔康處理CNE-1細(xì)胞不同時間(24h、48h、72h)后,用MTT法觀

2、察不同溶度、不同時間美洛昔康作用下CNE-1細(xì)胞的生長變化;將所選擇藥物作用于CNE-1細(xì)胞后,用AO+EB染色法、流式細(xì)胞儀檢測法測定美洛昔康不同溶度作用下不同時間后細(xì)胞的凋亡情況;采用細(xì)胞免疫熒光法檢測對照組和不同溶度美洛昔康作用48h后,CNE-1細(xì)胞內(nèi)COX-2蛋白的表達(dá)情況。
  結(jié)果:
  1.MTT比色法結(jié)果顯示:美洛昔康對CNE-1細(xì)胞生長有顯著的抑制作用,并且呈現(xiàn)出時間和劑量依賴性;隨藥物濃度加大和作用時間

3、延長,存活細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,在高溶度400umol/L時,48h后細(xì)胞生長抑制率高達(dá)50.3%;100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細(xì)胞24h,其抑制率分別為8.4%、10.3%、16.4%;100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細(xì)胞48h,其抑制率分別為10.4%、28.8%、50.3%;
  2.AO+EB染色法及流式細(xì)胞檢測法結(jié)果顯示:用不

4、同濃度的美洛昔康處理CNE-1細(xì)胞后,CNE-1細(xì)胞的凋亡率實驗組與對照組相比均表現(xiàn)為不同程度的誘導(dǎo)作用(P<0.05),并且這種誘導(dǎo)作用呈明顯的劑量-時間依賴性。AO+EB染色結(jié)果可見明顯的凋亡細(xì)胞存在,凋亡細(xì)胞數(shù)在高濃度美洛昔康組明顯增多,400μmol/L溶度組干預(yù)48h后,200個細(xì)胞凋亡細(xì)胞達(dá)35±3個,流式細(xì)胞儀檢查結(jié)果400μmol/L溶度組處理48h后細(xì)胞凋亡率為21.84±0.6%,與對照組有顯著性差異(p<0.05)

5、;
  3.細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示:CNE-1細(xì)胞中COX-2蛋白表達(dá)呈陽性率高,美洛昔康作用后,CNE-1細(xì)胞中COX-2蛋白陽性的表達(dá)受到抑制,美洛昔康濃度越高,其抑制COX-2表達(dá)的作用越明顯,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細(xì)胞48h后,細(xì)胞內(nèi)COX-2蛋白陽性表達(dá)率分別為39.61±0.34%、30.82±0.67%、23.03±1.12%,與對照組66.16±1.22%的陽

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