TFAR19蛋白對鼻咽癌CNE-1細胞株的凋亡效應(yīng)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 1、通過研究鼻咽癌細胞株CNE一1與重組TFARl9蛋白共同培養(yǎng)后CNE～1細胞株的凋亡比率,對重組TFAR19蛋白的促凋亡效應(yīng)提供有效的觀察指標。 2、通過測定鼻咽癌細胞株CNE一1與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng)前后CNE一1細胞株的端粒酶活性及hTERq、mRNA表達的變化,對重組TFARl9蛋白促凋亡的作用機理進行初步探討。 方法: 將不同濃度的高純度重組TFAR19蛋白分別和人類鼻咽癌細胞

2、株CNE-1共同培養(yǎng)后: 1、通過DNA片斷化分析,PI染色,7一AAD及Annexin V-PE標記進行流式細胞儀分析,觀察TFAR19蛋白對細胞的促凋亡效應(yīng)及凋亡百分率。 2、通過RT-PCR法比較兩組CNE一1細胞株(是否與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng))端粒酶hTERI、mRNA的表達水平。 3、通過TRAP一銀染法檢測與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng)后,觀察CNE一1細胞株端粒酶活性的改變。 結(jié)果：

3、 1、一定濃度的TFAR19蛋白在未加載體的情況下，可促進細胞凋亡，加入5mg／L，10 mg／L，15 mg／L，20 mg／L，30 mg／L的TFARl9蛋白后，鼻咽癌細胞株CNE-1的凋亡率分別是：15.26％，29.48％，37.11％，54.20％，72.36％。陰性對照組的細胞凋亡率是13.40％。 2、兩組CNE-1細胞株(是否與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng))端粒酶hTERT mRNA表達無顯著差異。

4、 3、加入20 mg／L和30 mg／L的重組TFAR19蛋白后，CNE-1細胞株端粒酶活性降低。5mg／L，10 mg／L，15 mg／L的重組TFARl9蛋白對CNE-1細胞株的端粒酶活性無明顯影響。 結(jié)論： 1、重組TFAR19蛋白可直接進入鼻咽癌細胞株CNE-1，明顯促進細胞凋亡，且對細胞的凋亡作用呈劑量依賴性。 2、重組TFAR19蛋白對鼻咽癌細胞株CNE-1的端粒酶hTERT mRNA表達無明顯影

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