大鼠變應(yīng)性鼻炎模型中轉(zhuǎn)錄因子T-bet-GATA-3表達的動態(tài)研究及大蒜新素對它們表達的影響.pdf

1、本廠研究目的: 研究變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis，AR)的大鼠動物模型在不同階段血液中單核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA-3表達的動態(tài)變化及其表達對Th1和TH2細(xì)胞因子的影響，以探索T-bet和GATA-3表達在AR發(fā)生發(fā)展中的作用。通過用大蒜新素對AR的大鼠動物模型進行干預(yù)，探索大蒜新素對T-bet和GATA-3表達的影響，尋求治療的新途徑。 研究方法: 20只SD大鼠隨機分成對照組和實

2、驗組，每組10只，雌雄不限。實驗組大鼠用雞卵蛋白致敏激發(fā)成AR動物模型，對照組用生理鹽水。在動物模型的制備過程中，分別在致敏結(jié)束，首次激發(fā)后10小時和末次激發(fā)后10小時各采集心臟血液標(biāo)本2ml，EDTA抗凝處理。用淋巴細(xì)胞分離液分離出血漿和單核細(xì)胞。用ELISA法檢測血漿中IL-4和IFN-γ的表達水平，用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法分析單核細(xì)胞中r-bet和GATA-3表達，計算二者的相對表達量。研究T-bet和GA

3、TA-3的表達與血漿中IL-4和IFN-γ的表達之間的關(guān)系。 30只SD大鼠隨機等分成藥物組，對照組和空白組。藥物組和對照組用OVA致敏激發(fā)建立成AR動物模型，對照組用生理鹽水。藥物組在AR動物模型建成后用大蒜新素對AR大鼠模型行腹腔注射，對照組和空白組腹腔注射生理鹽水，鼻部激發(fā)同前，共10天。末次注射后24小時，采集心臟血液標(biāo)本2ml，分離血漿和單核細(xì)胞，用上述方法檢測血漿中IL-4和IFN-γ的表達水平和單個核細(xì)胞中T-bet和GA

4、TA-3的表達，研究大蒜新素對T-bet和GATA-3表達的影響。 結(jié)論:1.變應(yīng)性鼻炎模型中血液單核細(xì)胞中GATA-3的表達逐漸增強，其表達上調(diào)。而T-bet在激發(fā)早期表達上調(diào)、增強，激發(fā)末期表達下調(diào)、減弱。變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生發(fā)展是連續(xù)的，程序化的動態(tài)的過程，GATA-3和T-bet表達失衡在AR發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。Th1和Th2細(xì)胞均參與了變應(yīng)性鼻炎過程，只是在氣道炎癥發(fā)展的不同時期，T淋巴細(xì)胞分泌IFN-γ及IL-4的能

5、力不同。 2. T-bet/GATA-3表達的比值與血漿中IFN-γ和IL-4濃度無相關(guān)關(guān)系，說明變應(yīng)性鼻炎除Th1和Th2細(xì)胞參與炎癥反應(yīng)外，其它炎癥細(xì)胞可能也參與炎癥反應(yīng)。T-bet/GATA-3表達的比值比Th1/Th2細(xì)胞因子的比值更能準(zhǔn)確的反應(yīng)變應(yīng)性鼻炎免疫失衡的狀態(tài)。 3.大蒜新素的作用機制可能是通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子T-bet的表達水平，促進Thl類細(xì)胞因子IFN-γ的分泌：并下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子GATA-3表達水平，抑