天府肉羊SCD1基因在肌肉中的表達(dá)與棕櫚油酸和油酸含量的相關(guān)性研究.pdf

1、硬脂酰輔酶A脫氫酶(SCD，stearoyl-CoA desaturase)屬于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)合蛋白，是飽和脂肪酸向單不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化的限速酶。無(wú)論是從頭合成還是從日糧中獲取的飽和脂肪酸，SCD均可以催化其在9號(hào)和10號(hào)碳原子之間脫氫形成一個(gè)雙鍵。SCD主要催化軟脂酸和硬脂酸形成棕櫚油酸和油酸，而且SCD在調(diào)節(jié)細(xì)胞膜流動(dòng)性和脂類代謝過(guò)程中也有著重要作用，這一作用是通過(guò)調(diào)節(jié)飽和脂肪酸與不飽和脂肪酸的比例完成的，提高這個(gè)比例會(huì)引發(fā)一系列疾病，例

2、如:肥胖、高血壓、糖尿病、免疫紊亂、心血管疾病和癌癥等。單不飽和脂肪酸在諸多疾病中的積極作用，使其在“健康肉”的生產(chǎn)中具有重要意義。此外，SCD1基因的單核苷酸多態(tài)性對(duì)肉質(zhì)中的pH、大理石紋等級(jí)、失水率、熟肉率、肌內(nèi)脂肪含量和肌肉顏色等性狀有顯著影響。
　　本試驗(yàn)采用RT-PCR、分子克隆、RT-qPCR、Western blotting以及氣象色譜法等實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)SCD1基因和肌肉脂肪酸進(jìn)行了初步研究，結(jié)果如下:
　　1.獲

3、得天府肉羊SCD1基因的編碼區(qū)全序列，序列長(zhǎng)1080 bp(GeneBank: KT315581)，編碼359個(gè)氨基酸。SCD1蛋白是疏水蛋白，含有12個(gè)磷酸化位點(diǎn)、4個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)可能的N-糖基化位點(diǎn)，不含信號(hào)肽序列。核酸和氨基酸序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)，SCD1基因與哺乳動(dòng)物具有高度的相似性，其中和綿羊的相似性最高。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明，天府肉羊SCD1基因與綿羊和牛的SCD1基因同源性最高，與黃顙魚(yú)SCD1基因同源性最低。
　　2.采

4、用RT-qPCR方法分析SCD1基因在90、180和270日齡天府肉羊的8個(gè)肌肉組織中的表達(dá)情況，結(jié)果表明，在檢測(cè)的肌肉組織中均有SCD1表達(dá)，并且日齡、肌肉及日齡與肌肉的交互作用對(duì)SCD1基因的mRNA相對(duì)表達(dá)水平均有極顯著影響。相同日齡不同肌肉的天府肉羊SCD1基因相對(duì)表達(dá)量的多重比較結(jié)果表明:3個(gè)年齡段的三角肌的SCD1基因相對(duì)表達(dá)量均極顯著高于其他7個(gè)肌肉組織(P＜0.01);90日齡臂三頭肌的SCD1基因相對(duì)表達(dá)量極顯著高于腓

5、腸肌和半膜肌(P＜0.01);180日齡腓腸肌、臂三頭肌和股二頭肌的SCD1基因相對(duì)表達(dá)量極顯著高于股四頭肌(P＜0.01);270日齡股二頭肌的SCD1基因相對(duì)表達(dá)量極顯著高于除三角肌以外的其他6個(gè)肌肉組織(P＜0.01)，并且臂三頭肌、半膜肌和背最長(zhǎng)肌的SCD1基因相對(duì)表達(dá)量極顯著高于臀中肌、腓腸肌和股四頭肌(P＜0.01)。相同肌肉在不同日齡的天府肉羊SCD1基因相對(duì)表達(dá)量的多重比較表明:天府肉羊8個(gè)肌肉組織的SCD1基因相對(duì)表達(dá)

6、量均表現(xiàn)出與日齡密切相關(guān)的趨勢(shì)，SCD1基因相對(duì)表達(dá)量先升高后降低，在180日齡達(dá)到最大值（P＜0.01），三角肌、股二頭肌、股四頭肌、腓腸?。≒＜0.01）和背最長(zhǎng)肌、半膜肌(P＜0.05)在3月齡的SCD1基因相對(duì)表達(dá)量最低。
　　3.采用Western blotting方法分析SCD1蛋白在90、180和270日齡天府肉羊的8個(gè)肌肉組織中的表達(dá)情況，結(jié)果表明，在所有檢測(cè)的肌肉組織中均有SCD1表達(dá)，3個(gè)年齡段的半膜肌SCD1

7、蛋白表達(dá)量均極顯著低于同日齡其他7個(gè)肌肉組織（P＜0.01)，90日齡背最長(zhǎng)肌和三角肌的SCD1蛋白表達(dá)量極顯著高于其他6個(gè)肌肉組織（P＜0.01），180日齡三角肌的SCD1蛋白表達(dá)量極顯著高于其他7個(gè)肌肉組織(P＜0.01)，270日齡臀中肌的SCD1蛋白表達(dá)量極顯著高于其他7個(gè)肌肉組織(P＜0.01)。
　　4.采用氣相色譜法分析測(cè)定90、180和270日齡天府肉羊的8個(gè)肌肉組織中棕櫚油酸和油酸的含量，結(jié)果表明，日齡對(duì)棕櫚油

8、酸和油酸含量有極顯著影響(P＜0.01），而肌肉以及肌肉和日齡的互作效應(yīng)對(duì)這兩種脂肪酸的含量影響不顯著。棕櫚油酸在180日齡的背最長(zhǎng)肌和臂三頭肌中的含量顯著高于臀中肌(P＜0.05)，油酸在270日齡的半膜肌中的含量顯著高于股四頭肌。除此之外，兩種脂肪酸在三個(gè)年齡段中不同肌肉間的含量沒(méi)有顯著性差異。隨著日齡的增長(zhǎng)，棕櫚油酸在各肌肉組織中的含量逐漸降低，而油酸的含量逐漸升高。臀中肌、三頭肌、股四頭肌和腓腸肌在90日齡的棕櫚油酸含量極顯著高

9、于270日齡(P＜0.01)，背最長(zhǎng)肌、三角肌、股二頭肌和半膜肌在90日齡的棕櫚油酸含量顯著高于270日齡（P＜0.05）。背最長(zhǎng)肌、三角肌、股二頭肌和半膜肌在270日齡的油酸含量顯著高于90日齡(P＜0.05)，其他4個(gè)肌肉組織在270日齡的油酸含量與90日齡無(wú)顯著性差異。
　　5.對(duì)SCD1基因、蛋白表達(dá)水平與肌肉組織中棕櫚油酸和油酸的相關(guān)性分析表明，SCD1基因在肌肉組織中的表達(dá)量與棕櫚油酸和油酸含量沒(méi)有顯著的相關(guān)性。SCD