絲裂霉素C預(yù)防家兔喉氣管狹窄的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、喉氣管狹窄的常見(jiàn)原因?yàn)楹須夤芡鈧⒏呶粴夤芮虚_(kāi)、氣管插管等造成瘢痕過(guò)度增生，瘢痕攣縮。目前治療的主要方法是內(nèi)鏡激光手術(shù)切除瘢痕后再置入支架維持一定的氣管通道，但存在一定的復(fù)發(fā)率，治療效果不理想。而藥物治療操作簡(jiǎn)單、能避免二次創(chuàng)傷，患者更容易接受，其中絲裂霉素C由于價(jià)格便宜，副作用小，一直是治療喉氣管狹窄研究最多的藥物。
　　關(guān)于瘢痕狹窄的基礎(chǔ)研究，研究學(xué)者普遍認(rèn)為瘢痕的形成與一系列細(xì)胞生長(zhǎng)因子水平的改變有密切關(guān)系，其中與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因

2、子β1（TGF-β1）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）關(guān)系最為密切。但在瘢痕形成的過(guò)程中，生長(zhǎng)因子之間有復(fù)雜的交叉，絲裂霉素C作用的機(jī)制仍待進(jìn)一步研究。
　　本課題通過(guò)構(gòu)建一種簡(jiǎn)單、穩(wěn)定的兔喉氣管狹窄模型，將絲裂霉素C作為單一變異因素，主要研究絲裂霉素C治療喉氣管狹窄的有效性和可行性。并初步探討絲裂霉素C抑制成纖維細(xì)胞增生的相關(guān)作用機(jī)制。
　　第一部分兔喉氣管狹窄模型的構(gòu)建和絲裂霉素C用藥效果監(jiān)測(cè)
　　目的檢測(cè)兔喉

3、氣管狹窄模型的穩(wěn)定性，探討絲裂霉素C在治療兔喉氣管狹窄中的作用。
　　方法將30只家兔按照簡(jiǎn)單隨機(jī)化分組分為對(duì)照組、模型組、0.5mg/ml低濃度用藥組、2mg/ml中濃度用藥組、5mg/ml高濃度用藥組。用喉氣管刮擦的方法制備喉氣管狹窄模型，用藥組的用藥方式為棉球覆蓋傷口表面。從模型組中隨機(jī)選取一只家兔于術(shù)后第9、18天在纖維喉鏡下觀察，術(shù)后20天取各組兔喉氣管狹窄組織做測(cè)量，分析比較各組喉氣管狹窄度。
　　結(jié)果模型組和用

4、藥組與對(duì)照組相比均出現(xiàn)明顯喉氣管狹窄（ p<0.05），中、高濃度用藥組喉氣管狹窄度明顯低于模型組（p<0.05），低濃度用藥組與模型組無(wú)明顯差異（p>0.05），中、高濃度用藥組之間相比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；3個(gè)用藥組各自組內(nèi)對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論本實(shí)驗(yàn)采用的兔喉氣管狹窄的建模方法穩(wěn)定有效，且操作簡(jiǎn)便，適用于各種喉氣管狹窄的實(shí)驗(yàn)研究。絲裂霉素C對(duì)預(yù)防和早期治療瘢痕性喉氣管狹窄具有重要作用。<

5、br>　　第二部分絲裂霉素C治療兔喉氣管狹窄機(jī)制研究
　　目的探討絲裂霉素C在兔成纖維細(xì)胞中的作用機(jī)制
　　方法取第一部分中模型組家兔喉氣管狹窄組織做兔成纖維細(xì)胞培養(yǎng)，分別置于0、2.5、12.5、50、100、200mg/L的絲裂霉素C中培養(yǎng)后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡差異，通過(guò)Western blot、熒光定量 PCR檢測(cè)細(xì)胞堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）在蛋白和mRNA轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)變