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文檔簡介
1、目的:探討促紅細(xì)胞生成素(EPO)對糖尿病大鼠心功能的保護(hù)作用及其機(jī)制。
方法:30只雄性SD大鼠(體重180-200g)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),隨機(jī)分成三組:正常對照(CON)組、糖尿病組(DM)、糖尿病+EPO(DM+EPO)組,每組10只,標(biāo)準(zhǔn)條件下喂養(yǎng)。DM組和DM+EPO組均采用鏈脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射建立糖尿病動(dòng)物模型,糖尿病大鼠建模成功后,DM+EPO組大鼠皮下注射EPO(1000U/kg),每周一次。CON組及DM
2、組注射同等劑量的生理鹽水。分別于實(shí)驗(yàn)前及第12周末對大鼠經(jīng)內(nèi)眥靜脈采血檢測血常規(guī)、血糖。并在12周末對大鼠行超聲心動(dòng)圖檢測評估其心功能,流式細(xì)胞儀檢測循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)計(jì)數(shù)。留取大鼠左心室心肌組織,應(yīng)用天狼星紅染色觀察心肌膠原含量,免疫組化技術(shù)檢測心肌組織CTGF蛋白表達(dá),Real Time RT-PCR技術(shù)檢測心肌組織VEGF mRNA表達(dá)情況,Western Blot技術(shù)定量檢測心肌組織VEGF蛋白表達(dá)情況。
結(jié)果
3、:(1)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、空腹血糖結(jié)果:第12周末正常對照組、糖尿病組和糖尿病+EPO組三組大鼠的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)分別為:(8.16±0.37)×1012/L、(7.68±0.44)×1012/L、(8.63±0.47)×1012/L,糖尿病組和糖尿病+EPO組紅細(xì)胞數(shù)量與正常對照組相比無明顯差異(P>0.05);而糖尿病+EPO組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)較糖尿病組增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。12周末三組大鼠空腹血糖值分別為:4.13+0.43mm
4、ol/L、20.27+1.20mmol/L、21.37±1.53 mmol/L,糖尿病組與糖尿病+EPO組相比血糖無明顯差異(P>0.05),但兩組血糖均高于對照組(P<0.01),而糖尿病+EPO組在EPO治療前后血糖亦無明顯差異(P>0.05)。(2)超聲心動(dòng)圖心功能檢測結(jié)果:三組大鼠的左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)分別為79.4±8.12%、65.7±5.49%、75.6±4.87%,糖尿病組LVEF較正常對照組降低(P<0.01);
5、而糖尿病+EPO組LVEF較糖尿病組升高(P<0.01);糖尿病+EPO組較正常對照組降低,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)循環(huán)EPCs計(jì)數(shù):實(shí)驗(yàn)第12周末三組大鼠循環(huán)中EPCs計(jì)數(shù)分別為:7.65±0.90%、2.71±0.74%、51.75±1.91%,其中糖尿病+EPO組明顯高于正常對照組和糖尿病組(P<0.01),并且正常對照組也高于糖尿病組(P<0.01)。(4)天狼星紅染色顯示DM組大鼠心肌間質(zhì)膠原與CON組相
6、比明顯增加,而DM+EPO組膠原含量比DM組明顯減少。(5)免疫組化檢測心肌組織CTGF蛋白表達(dá)情況:正常對照組為低度陽性,糖尿病組為高度陽性,糖尿病+EPO組為中度陽性。(6)心肌組織VEGF mRNA表達(dá)情況:三組大鼠VEGF mRNA表達(dá)量分別為1.01±0.15、0.82±0.07、1.18±0.11,糖尿病+EPO組較正常對照組和糖尿病組大鼠VEGFmRNA的表達(dá)明顯增高(P<0.05);糖尿病組與正常對照組相比VEGF mR
7、NA表達(dá)降低(P<0.05)。(7)三組大鼠的VEGF蛋白表達(dá)量分別為0.40±0.032、0.23±0.024、0.59±0.026,糖尿病組VEGF蛋白表達(dá)明顯低于正常對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);糖尿病+EPO組VEGF蛋白表達(dá)明顯高于正常對照組(P<0.01);糖尿病+EPO組VEGF蛋白表達(dá)也明顯高于糖尿病組(P<0.01)。
結(jié)論:1、EPO在不影響血糖水平的情況下可明顯改善糖尿病大鼠的心功能,抑制心
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