白藜蘆醇對(duì)惡性黑素瘤抗癌機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文白藜蘆醇對(duì)惡性黑素瘤抗癌機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李東升申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師：李家文201105華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文6方法：方法：采用MTT法檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)人惡性黑素瘤細(xì)胞系A(chǔ)375及小鼠惡黑細(xì)胞系B16F1增殖的影響；AnnexinVPI雙標(biāo)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)A375、B16F1細(xì)胞凋亡的影響，PI單標(biāo)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定白藜蘆醇對(duì)A375、B16F1細(xì)胞DNA分

2、布的影響；Western印跡法檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)A375細(xì)胞Bcl2、Bax、cyclinD1及p21蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果：結(jié)果：白藜蘆醇對(duì)A375、B16F1細(xì)胞具有明顯的抑制增殖作用，其抑制增殖作用呈量效及時(shí)效關(guān)系。25μmolL白藜蘆醇作用24h即可誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡，其細(xì)胞凋亡率為（16.72.1）%；100μmolL白藜蘆醇作用24h時(shí)B16F1細(xì)胞凋亡率可達(dá)（39.63.3）%。100μmolL白藜蘆醇作用12h時(shí)A375細(xì)胞

3、凋亡率為（17.21.7）%，作用72h時(shí)細(xì)胞凋亡率則高達(dá)（52.34.1）%；相同濃度白藜蘆醇作用12h時(shí)B16F1細(xì)胞凋亡率為（18.41.6）%，作用72h時(shí)細(xì)胞凋亡率則可達(dá)（56.74.5）％。白藜蘆醇處理組A375及B16F1細(xì)胞周期均發(fā)生變化，細(xì)胞周期被阻滯于G1期。此阻滯效應(yīng)隨白藜蘆醇濃度的增加而增加：25μmolL白藜蘆醇作用24h時(shí)A375及B16F1細(xì)胞G1期比例分別為（40.513.97）％、（41.343.12）

4、％，100μmolL白藜蘆醇作用相同時(shí)間時(shí)其G1期比例分別為（55.644.95）％、（53.935.12）％。白藜蘆醇明顯下調(diào)A37細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl2及細(xì)胞周期蛋白cyclinD1的表達(dá)，同時(shí)上調(diào)促凋亡蛋白Bax及p21蛋白的表達(dá)水平。結(jié)論：結(jié)論：白藜蘆醇可通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而有效抑制惡性黑素瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，其調(diào)控細(xì)胞周期及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制分別與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白cyclinD1p21及凋亡相關(guān)蛋白Bcl2Bax的表達(dá)