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1、目的:建立急性肺損傷的炎癥動(dòng)物模型,觀察白藜蘆醇的抗炎作用,分析抗炎效應(yīng)與SSAO的關(guān)系,探討白藜蘆醇抗炎作用新機(jī)制。
方法:選擇雄性新西蘭兔建立炎癥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,采用氣管插管灌注脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)誘導(dǎo)急性肺部炎癥。實(shí)驗(yàn)設(shè)對(duì)照組、LPS炎癥模型組、DMSO溶劑組、白藜蘆醇(Resveratrol, Res,設(shè)30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg三個(gè)劑量)預(yù)防組,SSAO高效選
2、擇性抑制劑2-溴乙胺(2-Bromoethylamine,2-BEA)組等;采用肺濕重/干重比值(W/D)及肺組織炎癥病理改變判斷模型是否建立成功,采用ELISA法測(cè)定給藥前后血清IL-1β、IL-6、PGE2、iNOS等炎癥因子水平配合病理改變判斷炎癥發(fā)生情況;采用高效液相色譜法測(cè)定血漿SSAO活性,分析上述指標(biāo)以判斷炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度與SSAO的關(guān)系,觀察二溴乙胺及不同劑量的白藜蘆醇對(duì)新西蘭兔急性肺損傷發(fā)生發(fā)展的影響。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SP
3、SS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,SigmaPlot8.0繪制統(tǒng)計(jì)圖。
結(jié)果:
1、Res、2-BEA對(duì)雄性新西蘭兔肺濕重/干重比值(W/D)的影響:LPS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肉眼觀察肺組織水腫明顯,肺濕重/干重比值(W/D)較對(duì)照組顯著升高(P<0.05);Res明顯降低LPS所致的炎癥模型動(dòng)物肺濕重/干重比值(W/D)(P<0.05);2-BEA能顯著降低LPS所致的炎癥模型動(dòng)物肺濕重/干重比值(W/D)(P<0.05)。
4、r> 2、Res、2-BEA對(duì)雄性新西蘭兔肺組織炎性病理改變的影響:LPS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺組織水腫,點(diǎn)、片狀出血,有大量彌漫性炎細(xì)胞浸潤,肺泡間隔增寬,肺泡腔變窄,肺泡壁結(jié)構(gòu)受損甚至消失,大量細(xì)胞脫落。2-BEA和三個(gè)劑量的Res不同程度的減輕LPS誘導(dǎo)的肺炎癥性損傷反應(yīng)。
3、Res、2-BEA對(duì)雄性新西蘭兔血清IL-1β、IL-6、PGE2、iNOS的影響:LPS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清IL-1β、IL-6、PGE2、iNOS
5、水平上升,IL-1β、IL-6、iNOS明顯高于對(duì)照組(P<0.05);三個(gè)劑量的Res降低LPS所致的炎癥模型動(dòng)物血清IL-1β、IL-6、PGE2、iNOS水平,其中60mg/kg、120mg/kg的Res明顯抑制炎癥反應(yīng)(P<0.05);2-BEA顯著降低模型動(dòng)物血清IL-1β、IL-6、iNOS水平(P<0.05),對(duì)PGE2無影響。
4、Res、2-BEA對(duì)雄性新西蘭兔血漿SSAO活性的影響:LPS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血漿
6、SSAO活性顯著上升,高于對(duì)照組(P<0.05);三個(gè)劑量的Res明顯降低LPS所致的炎癥模型動(dòng)物血漿SSAO活性(P<0.05);2-BEA顯著降低模型動(dòng)物血漿SSAO活性(P<0.05)。
結(jié)論:
1、LPS明顯誘導(dǎo)雄性新西蘭兔肺組織急性炎性損傷,使動(dòng)物血清IL-1β、IL-6、iNOS等炎癥因子水平顯著升高,血漿SSAO活性明顯升高,具有明顯相關(guān)性。
2、Res、2-BEA具有減輕模型動(dòng)物急性炎性肺損
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