不同培養(yǎng)條件下胚胎瘦素的表達.pdf

1、本文研究目的：觀察不同培養(yǎng)條件下小鼠胚胎培養(yǎng)液中瘦素的分泌情況，分析培養(yǎng)條件對胚胎的影響。應用小鼠移植模型觀察胚胎自分泌瘦素水平及形態(tài)學評分與著床及妊娠的關系，探討瘦素水平對胚胎質量及其種植潛能的預測價值。 研究方法：將小鼠2-細胞期胚胎在三種不同培養(yǎng)條件下分別培養(yǎng)至4-細胞期、8-細胞期、桑葚胚及囊胚期：(1)單純序貫培養(yǎng)組；(2)共培養(yǎng)組-序貫培養(yǎng)組；(3)體內發(fā)育組。將發(fā)育的同期胚胎(2-細胞期、4-細胞期、8-細胞期、桑

2、葚胚及囊胚期)分別在50ul微滴中培養(yǎng)6小時，移出胚胎后收集微滴。應用ELISA法測定瘦素分泌情況。囊胚供移植用，11日后觀察其受孕情況，比較瘦素水平與形態(tài)學評分對胚胎著床能力的預測效果。 研究結果： 1、共培養(yǎng)-序貫培養(yǎng)組8-細胞期之后胚胎的發(fā)育速度、囊胚形成率均高于單純序貫培養(yǎng)組(P＜0.05)。 2、三組桑葚胚之前的培養(yǎng)微滴中均未檢測到瘦素的分泌，但在桑葚胚及囊胚5胚/滴的培養(yǎng)微滴中可檢測到。其中體內發(fā)育組

3、明顯高于單純序貫培養(yǎng)組和共培養(yǎng)-序貫培養(yǎng)組(P＜0.05)，后兩組之間無顯著性差異(P＞0.05)。 3、形態(tài)學上評分相同的胚胎瘦素高分泌組著床率明顯高于低分泌組(P＜0.01)；瘦素高分泌的3BB組囊胚著床率高于低分泌的3AA組囊胚(P＜0.05)。 研究結論： 1.共培養(yǎng)-序貫培養(yǎng)組較單純序貫培養(yǎng)組有更高的囊胚形成率，共培養(yǎng)-序貫培養(yǎng)對胚胎發(fā)育的促進作用在8-細胞期胚以后更明顯。 2.胚胎在桑葚胚以后