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文檔簡介
1、目的:體外培養(yǎng)大鼠C6細(xì)胞,從中分離、培養(yǎng)與鑒定膠質(zhì)瘤干細(xì)胞,比較普通膠質(zhì)瘤細(xì)胞及膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的致瘤性;由大鼠骨髓提取單核細(xì)胞誘導(dǎo)分化為樹突細(xì)胞,分別用膠質(zhì)瘤細(xì)胞、膠質(zhì)瘤干細(xì)胞全細(xì)胞抗原致敏樹突細(xì)胞制備疫苗;構(gòu)建大鼠腦膠質(zhì)瘤模型,經(jīng)尾靜脈分別注射兩種樹突細(xì)胞疫苗,觀察大鼠生存情況并分析。
方法:體外常規(guī)培養(yǎng)C6細(xì)胞,取對數(shù)生長期細(xì)胞于無血清干細(xì)胞培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞,有限稀釋法觀察其增殖能力,并對其進(jìn)行鑒定。分別將C
2、6及膠質(zhì)瘤干細(xì)胞接種于大鼠皮下,行PET-CT檢查比較其致瘤性;提取大鼠骨髓源性單核細(xì)胞,加入細(xì)胞因子誘導(dǎo)成樹突狀細(xì)胞并對其鑒定,分別加入C6及膠質(zhì)瘤干細(xì)胞凍融抗原,制備樹突細(xì)胞疫苗;利用立體定向方法建立大鼠腦膠質(zhì)瘤模型,觀察其生存期、生活狀態(tài),腫瘤病理特點(diǎn),行MRI檢查觀察腫瘤生長規(guī)律;分別將兩種樹突細(xì)胞疫苗由尾靜脈注入腦內(nèi)已成瘤大鼠體內(nèi),觀察比較大鼠生存期,對生存情況進(jìn)行分析。
結(jié)果:膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中呈細(xì)胞球樣
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