夏天無注射液對(duì)缺血再灌注大鼠腦組織NF-κB信號(hào)通路影響的研究.pdf

1、目的:探討夏天無注射液(Injection Coryadlis Decumbens Pers,ICDP)對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的機(jī)制研究。
　　 方法:SD雄性大鼠60只,隨機(jī)分為6組:1.模型組:(生理鹽水)2.5ml/kg,im;2.假手術(shù)組:(生理鹽水)2.5ml/kg,im;3.ICDP高劑量組:5ml/kg,im;4.ICDP中劑量組:2.5ml/kg,im;5.ICDP低劑量組:1ml/kg

2、,im;6.NF-κB抑制劑BAY11-7082組:10mg/kg,尾靜脈注射;每組10只。參照改進(jìn)的Zea Longa方法建立大鼠腦缺血再灌注模型,除假手術(shù)組外,每組分別予腦缺血2小時(shí)再灌注24小時(shí)。大鼠麻醉后2.5小時(shí)行神經(jīng)功能評(píng)分,篩選成功的動(dòng)物模型,再灌24小時(shí)后再次行神經(jīng)功能評(píng)分。TTC染色觀察各組大鼠腦組織梗死面積并稱重及計(jì)算梗死重量百分比;常規(guī)蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)

3、染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化;酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測大鼠血漿腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá);免疫組織化學(xué)染色觀察大鼠腦組織NF-κ B p65的表達(dá)及核轉(zhuǎn)位情況;用Western blot檢測NF-κ B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在腦組織中的活化情況。
　　 結(jié)果:1.神經(jīng)功能評(píng)分:與假手術(shù)組比較,模型組、BAY組、ICDP高、中、低劑量組神經(jīng)功能均有不同程度下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,ICDP高、中、低劑量組、BAY組神經(jīng)功能均

4、有不同程度提高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.TTC染色后計(jì)算腦梗死重量百分比:假手術(shù)組未見梗死灶;模型組梗死范圍較大,梗死重量百分比為(20.34±1.29);與模型組比較,ICDP高、中、低劑量組梗死范圍明顯縮小(P＜0.01)。3.組織形態(tài)學(xué)改變:ICDP高、中劑量組、BAY組與模型組比較,腦組織病理學(xué)改變有不同程度的減輕。4.免疫組化結(jié)果示:非磷酸化的NF-κ B p65主要表達(dá)在細(xì)胞胞漿中,無明顯核表達(dá),磷酸化的NF-κ B p65

5、主要表達(dá)在細(xì)胞胞核中。5.酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)示:假手術(shù)組血漿TNF-α陽性表達(dá)少;模型組陽性表達(dá)顯著增強(qiáng);與模型組比較,ICDP-H和ICDP-M組和BAY組陽性表達(dá)明顯下降(P＜0.01),與假手術(shù)組比較各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.Western Blot結(jié)果示,假手術(shù)組可少量表達(dá)NF-κ B蛋白;與模型組比較,夏天無高中低劑量組及BAY組蛋白表達(dá)明顯減少。
　　 結(jié)論:1.ICDP可改善大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)功能損傷,減少腦梗死病