rhEPO對大鼠腎缺血再灌注損傷中TLR4-NF-κB通路的影響.pdf

1、目的:觀察不同時段相同劑量重組人促紅細胞生成素(rhEPO)對大鼠腎缺血再灌注損傷中TLR4/NF-κB信號通路的影響，探討TLR4/NF-κB信號通路在大鼠腎缺血再灌注損傷中所起的作用及其作用機制，分析重組人促紅細胞生成素對腎臟的保護作用及不同干預時間的效果差異及其機制。
　　方法:將70只雄性SD大鼠隨機等分為假手術(shù)組（Sham組）10只、缺血再灌注組（IR組）10只、rhEPO干預組50只。rhEPO干預組包括:缺血前6h注

2、射rhEPO組（P6組）10只、缺血前2h注射rhEPO組（P2組）10只、缺血0h注射rhEPO組（P0組）10只、缺血后2h注射rhEPO組（A2組）10只、缺血后6h注射rhEPO組（A6組）10只。假手術(shù)組單純切除右腎，分離但不夾閉左側(cè)腎動脈，不造成缺血再灌注，45min后關(guān)閉腹腔，并尾靜脈注射同等量的生理鹽水，24h后留取標本;缺血再灌注組切除右腎，分離并夾閉左側(cè)腎動脈造成缺血再灌注，45min后關(guān)閉腹腔，24h后留取標本;前

3、6h組（P6組）:按照模型組的方法，在切除右腎之后尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，6h之后打開腹腔并夾閉左側(cè)腎動脈，之后同模型組;前2h組（P2組）:在切除右腎之后尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，2小時之后夾閉左側(cè)腎動脈，之后同上;0h組（P0組）:在切除右腎并分離好左腎動脈之后，夾閉左腎動脈的同時尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，之后同上;后2h組（A2組）:按照模型組的方法，在夾閉左側(cè)腎動脈之后的2小時由尾靜脈注射r

4、hEPO2000u/kg，之后同上;后6h組（A6組）:按照模型組的方法，在夾閉左側(cè)腎動脈之后的6小時由尾靜脈注射rhEPO2000u/kg，之后同上。
　　HE法觀察腎組織病理學形態(tài)，自動生化分析儀測定BUN、Cr水平，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)法檢測腎組織中TLR4和NF-κBmRNA含量，免疫組織化學法檢測腎小管上皮細胞中TLR4和NF-κBp50蛋白表達。
　　結(jié)果:IR組較Sham組腎組織病理學明顯改變

5、，BUN、Cr水平、TLR4、NF-κBmRNA含量，TLR4蛋白（在胞漿表達）、NF-κBp50蛋白（在胞核和胞漿都表達）含量表達均增高(P＜0.05)。rhEPO干預組較IR組腎組織病理學均較輕，BUN、Cr水平、TLR4、NF-κBmRNA含量，TLR4、NF-κBp50蛋白含量表達均減少(P＜0.05)。干預組中，P6、P2組均比P0、A2、A6組腎組織病理學均較輕，BUN、Cr水平、TLR4、NF-κBmRNA含量，TLR4、