尼莫地平自微乳處方優(yōu)化及其體內(nèi)外評價.pdf

1、目的：尼莫地平是臨床常用的二氫吡啶類鈣拮抗劑，但其水溶性差，首過效應(yīng)明顯，生物利用度僅為4.8％～8.8％。自微乳制劑是提高藥物生物利用度、減少不良反應(yīng)的新型制劑，其能夠顯著提高藥物的溶出度，可通過淋巴循環(huán)進入血液，從而避免首過效應(yīng)。本研究根據(jù)自乳化原理，設(shè)計優(yōu)化尼莫地平自微乳制劑處方，可望提高尼莫地平的生物利用度，為研制各方面性能優(yōu)良的尼莫地平自微乳制劑奠定基礎(chǔ)。
　　方法：（1）通過溶解度測定選擇尼莫地平自微乳制劑的輔料；采用

2、差示掃描量熱分析，觀察藥物與輔料之間以及輔料之間的相互作用；按照處方設(shè)計制備21個處方的自乳化液，對其進行體外評價，包括目測、乳化效率、粒徑分布、吸光度和溶出度等實驗，并在透射電鏡下觀察，綜合考慮確定最優(yōu)處方。（2）分離大鼠全段小腸，由斷口注入冰生理鹽水，充分洗凈腸腔后用充有混合氣體（95％O2，5％CO2）的Krebs氏液清洗1～2次，然后用玻棒將腸管粘膜面向外翻轉(zhuǎn)，將腸段一端結(jié)扎，由另一端注入Krebs氏液2mL，然后封閉成雙側(cè)均為

3、盲端的腸囊備用。將腸囊置于通有混合氣體（95％O2，5％CO2）的Krebs氏液中（37℃），轉(zhuǎn)槳轉(zhuǎn)速50r·min-1,在0min時分別加入含尼莫地平10、20、40mg的自微乳，孵育30、60、90、120、240min，取出腸囊。用Krebs氏液清洗2～3次，電子天平稱重，以每克小腸組織加入5mL生理鹽水的標準定量加入生理鹽水，勻漿器制備勻漿，采用HPLC方法檢測勻漿液中尼莫地平的含量。將大鼠小腸取出后按照上、中、下段各取10cm

4、，同上法制備腸囊，在如上中劑量時考察不同腸段在120min時的吸收情況。以小腸組織中蛋白含量為參照，以小腸組織中尼莫地平含量為指標，觀察尼莫地平自微乳制劑和尼莫地平普通片在大鼠小腸的吸收情況。（3）大鼠分別灌胃給予尼莫地平普通片混懸液和尼莫地平自微乳制劑，劑量均為12.5mg/kg，給藥后分別在0，15，30，60，90，120，180，240，480，720min時大鼠眼眶靜脈叢取血，并設(shè)置尼莫地平靜脈注射組，劑量為1.25mg/kg

5、，給藥后分別在0，5，10，20，40，60，120，180，240，480，720min時大鼠眼眶靜脈叢采集血液標本，樣本經(jīng)過提取后HPLC測定其中尼莫地平濃度，得到血藥濃度-時間數(shù)據(jù)，采用DAS2.1.1版藥動學(xué)分析軟件對血藥濃度-時間數(shù)據(jù)進行分析并計算主要藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：（1）最優(yōu)處方為尼莫地平、油酸乙酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油-35和單辛酸甘油酯的質(zhì)量百分數(shù)分別為3.5％、40％、40％和16.5％。在0.1mol

6、?L-1稀鹽酸中輕微攪拌，該處方能夠在1min內(nèi)迅速乳化，目測澄清，略顯淡藍色乳光，激光粒徑分布測定得到粒徑均值為58.6nm的水包油型乳滴，在0.1mol?L-1稀鹽酸中的溶出度在1min時即達到了84.3％，且在實驗室條件下避光放置3個月性質(zhì)保持穩(wěn)定。（2）建立了檢測大鼠小腸勻漿中尼莫地平含量的高效液相方法，采用C18柱（250x4.6mm,5μm,phenomenex）為分析柱，柱溫25℃；流動相組成為乙腈：水=70：30（v/v

7、），檢測波長350nm；流速1mL?min-1；進樣量20μL。尼莫地平標準曲線回歸方程為Y=5.9968X+0.0415，r=0.9995，線性范圍為0.02～1.0mg·L-1。與尼莫地平普通片相比，尼莫地平自微乳制劑顯著提高了孵育后藥物在小腸組織中的濃度，且呈劑量依賴性關(guān)系，孵育至60min時基本達到飽和。尼莫地平自微乳在大鼠小腸全段均有吸收，吸收量隨上、中、下腸段遞減，在尼莫地平自微乳制劑劑量為20mg時，尼莫地平在上、中、下腸

8、段的吸收量分別為0.0281±0.0036，0.0240±0.0031，0.0218±0.0026μg/100μg蛋白。（3）建立了檢測大鼠血漿中尼莫地平含量的高效液相方法，采用C18柱（250x4.6mm,5μm,phenomenex）為分析柱，柱溫25℃；流動相組成為乙腈：水=70：30（v/v），檢測波長350nm；流速1mL?min-1；進樣量20μL。尼莫地平標準曲線回歸方程為Y=2.2872X+0.1645，r=0.9991

9、，線性范圍為0.02～1.0mg·L-1。尼莫地平普通片和尼莫地平自微乳的Cmax分別為0.101±0.018mg·L-1和0.147±0.085mg·L-1，AUC分別為9.674±1.674mg·min·L-1和19.620±7.275mg·min·L-1，MRT分別為71.784±2.739min和199.636±62.382min，達峰時間無差異。尼莫地平自微乳制劑的絕對生物利用度為9.84％，以尼莫地平市售普通片劑為參比制劑，