CA自微乳的研制.pdf

1、CA是由藤澤制藥公司于1982年提取的一種真菌代謝產(chǎn)物。適用于防治器官移植后的排斥反應(yīng),其臨床療效是環(huán)孢素(CsA)的10～100倍。CA自1989年試用于臨床以來,取得了良好的評(píng)價(jià)?，F(xiàn)已作為預(yù)防、治療排斥反應(yīng)以及自身免疫性肝炎的一線藥物。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)主要為進(jìn)口的CA固體分散體膠囊,價(jià)格昂貴。由于CA在水中幾乎不溶,溶解度僅為2～3μg/ml,并且CA很不穩(wěn)定,因此本研究選擇了制備一種能增大CA溶解度,提高其穩(wěn)定性的制劑。
　　

2、 自微乳藥物傳遞系統(tǒng)(self-mieroemulsifying drug delivery system,SMEDDS)由油相、乳化劑和助乳化劑組成,口服后在胃腸蠕動(dòng)下自發(fā)分散形成微乳,SMEDDS可作為水難溶性藥物的載體,可提高藥物的溶出度和滲透率,能增加藥物的口服生物利用度,近年來受到藥學(xué)領(lǐng)域的矚目。結(jié)合CA的理化性質(zhì)和SMEDDS在提高難溶性藥物生物利用度方面的優(yōu)勢(shì),本課題選擇了制備CA自微乳,并對(duì)其穩(wěn)定性和生物利用度進(jìn)行了研究

3、。目前國(guó)內(nèi)外還未有CA自微乳劑型上市,因此CA自微乳的研究具有現(xiàn)實(shí)意義。
　　 目的:選擇合適的乳化劑、助乳化劑、油相、穩(wěn)定劑,制備CA自微乳。建立CA自微乳體內(nèi)、外分析方法,對(duì)CA自微乳進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià),并對(duì)CA自微乳的穩(wěn)定性和生物利用度進(jìn)行考察。
　　 方法:
　　 1 CA自微乳的制備:首先對(duì)空白自微乳的基本處方進(jìn)行了篩選并確定了空白處方的組成。然后對(duì)穩(wěn)定劑進(jìn)行了篩選,選擇穩(wěn)定劑A作為CA自微乳的穩(wěn)定劑,選擇B

4、HT作為抗氧劑。在處方優(yōu)化過程中,確定了處方的含藥量,對(duì)處方中的乳化劑、助乳化劑、油相以及穩(wěn)定劑的用量進(jìn)行了優(yōu)化。按優(yōu)化后的處方制備穩(wěn)定性較高的CA自微乳,并壓制CA自微乳軟膠囊,用于溶出度測(cè)定和動(dòng)物試驗(yàn)。
　　 2 CA自微乳的質(zhì)量評(píng)價(jià):建立CA自微乳含量和溶出度測(cè)定的HPLC方法。對(duì)CA自微乳的外觀、粘度和稀釋后微乳的粒徑、Zeta電位進(jìn)行考察。按最佳處方制備CA自微乳,分別進(jìn)行高溫試驗(yàn)、強(qiáng)光照射試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期穩(wěn)定性試

5、驗(yàn),對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行考察。
　　 3 CA自微乳的藥代動(dòng)力學(xué)研究:以健康雄性家犬為試驗(yàn)動(dòng)物,考察CA自微乳軟膠囊的藥代動(dòng)力學(xué),并與參比制劑進(jìn)行了比較。采用單劑量方式口服給藥(0.5mg/kg),定時(shí)股靜脈取血,用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血藥濃度。采用3p87程序?qū)ρ帩舛葦?shù)據(jù)進(jìn)行處理,對(duì)比兩制劑在家犬體內(nèi)的生物利用度。
　　 結(jié)果:
　　 1從穩(wěn)定性、稀釋后粒徑、溶出度、生物利用度等方面綜合考慮,最終確定了CA自微

6、乳的最佳處方為:CA0.5g聚氧乙烯氫化蓖麻油(RH40)40g1,2-丙二醇15g小分子酯(CP)44g穩(wěn)定劑A1.0gBHT0.05g
　　 2HPLC測(cè)定CA自微乳含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:A=1.6225×104X-9.9332×103,(r=0.9999,n=7)
　　 溶劑選用50％的乙腈-水溶液,此時(shí)CA異構(gòu)體Ⅱ的轉(zhuǎn)化比例為4.93％。方法平均回收率為99.89％,低、中、高3種濃度樣品的日內(nèi)測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)

7、偏差(RSD)分別為1.43％、1.57％、0.58％(n=6);中濃度樣品日間測(cè)定結(jié)果的RSD為1.32％(n=6),均符合中國(guó)藥典規(guī)定。
　　 3 HPLC測(cè)定CA自微乳軟膠囊溶出度的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:A=7.253×104X-8.996×103,(r=0.9999,n=7)
　　 溶出度測(cè)定方法按中國(guó)藥典2005年版附錄XC第三法,溶出介質(zhì)為純水100ml,水溫為37±0.5℃,轉(zhuǎn)速為100r/min。低、中、高三種

8、濃度樣品的回收率分別為99.14％、99.51％、99.59％,連續(xù)測(cè)定濃度為0.01mg/ml的同一樣品6次,峰面積的RSD值為1.43％,符合中國(guó)藥典規(guī)定。
　　 4 CA自微乳的質(zhì)量評(píng)價(jià)及穩(wěn)定性研究
　　 按最佳處方制備的CA自微乳為無色透明均一的液體,25℃時(shí),粘度為46.0mPa·s;CA自微乳用重蒸水稀釋200倍后,形成微乳的粒徑約為17nm,Zeta電位為-21.3mV(25℃)。高溫試驗(yàn)結(jié)果表明CA自微乳

9、在60±2℃下放置10天,樣品外觀、粘度、粒徑無明顯變化,但含量約降低了5％,有關(guān)物質(zhì)增長(zhǎng)了0.41％;強(qiáng)光照射試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),CA自微乳對(duì)4500±5001x的強(qiáng)光敏感,放置10天后有關(guān)物質(zhì)略有增加;加速試驗(yàn)顯示CA自微乳在40±2℃,相對(duì)濕度75±5％條件下加速6個(gè)月,三批樣品的外觀、粘度、粒徑均無明顯變化,含量約降低了3％,有關(guān)物質(zhì)在2％以內(nèi);長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察顯示9個(gè)月后三批樣品有關(guān)物質(zhì)分別為0.29％、0.27％、0.24％,含量降低值

10、在1％以內(nèi),結(jié)果表明在25±2℃條件下,CA自微乳的穩(wěn)定性較高。
　　 5采用3p87程序?qū)ρ帩舛葦?shù)據(jù)進(jìn)行處理,結(jié)果表明最佳擬合模型為二級(jí)模型一級(jí)吸收,權(quán)重因子為1/c2。CA自微乳軟膠囊和參比制劑的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)分別為:t1/2(α):1.37 h,2.39 h;t1/2(β):13.13 h,19.54 h;T(peak):0.79 h,2.92 h;C(max):36.21 ng/ml,11.49 ng/ml;AUC:2