靶向Ang2的siRNA聯(lián)合奧沙利鉑對(duì)子宮內(nèi)膜癌裸鼠移植瘤生長的影響.pdf

1、目的：觀察靶向血管生成素2(Angiopoietin2,Ang2)的小干擾RNA聯(lián)合奧沙利鉑對(duì)子宮內(nèi)膜癌裸鼠移植瘤生長和血管的抑制作用。
　　 方法：每只裸鼠皮下注射約2.0x106的ishikawa細(xì)胞,建立子宮內(nèi)膜癌裸鼠移植瘤模型。成瘤后40只裸鼠隨機(jī)分為5組:空白對(duì)照(生理鹽水)組、陰性對(duì)照(pCMV-neg)組、pCMV—shRNA—Ang2(siRNA—Ang2)組、奧沙利鉑組及siRNA-Ang2和奧沙利鉑聯(lián)合組,分

2、別進(jìn)行治療。每3天進(jìn)行一次瘤內(nèi)注射,治療27天后測量腫瘤體積計(jì)算抑瘤率,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Westernblotting分別檢測各組腫瘤組織中Ang2 mRNA和Ang2蛋白質(zhì)的表達(dá)水平,免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測并定量計(jì)數(shù)各組腫瘤組織微血管。
　　 結(jié)果：細(xì)胞注射后第7天瘤體開始出現(xiàn),第14天腫瘤直徑達(dá)5-7mm。治療結(jié)束后,各組移植瘤體積進(jìn)行比較,奧沙利鉑組、siRNA-Ang2組以及聯(lián)合用藥組與空白對(duì)照組比較

3、腫瘤體積明顯減小,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01)。而聯(lián)合用藥組腫瘤體積又明顯小于奧沙利鉑組和siRNA-Ang2組(P值均<0.01)。陰性對(duì)照組腫瘤體積與空白對(duì)照組相比無明顯差異(P=0.067)。RT-PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳分析顯示Ang2 mRNA在siRNA-Ang2組、奧沙利鉑組和聯(lián)合用藥組的表達(dá)均明顯低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01)。而聯(lián)合用藥組Ang2mRNA表達(dá)量又明顯低于奧沙利鉑組和s

4、iRNA-Ang2組,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01)。Western blotting檢測各組Ang2蛋白質(zhì)表達(dá)量,結(jié)果與RT-PCR相符。奧沙利鉑組、siRNA-Ang2組以及聯(lián)合用藥組三組腫瘤組織MVD較陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組均減少,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01),而聯(lián)合用藥組MVD又明顯少于奧沙利鉑組和siRNA-Ang2組,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。
　　 結(jié)論：靶向Ang2的小干擾RNA可以