蠶蛹粗提浸液致敏小鼠過敏模型建立.pdf

1、目的:
　　家蠶過敏是一種具有中國特色的職業(yè)性過敏與食物過敏,家蠶蛋白有較強的過敏原活性也是主要的過敏原。建立蠶蛹粗提浸液致敏BALB/ C小鼠腸道和哮喘模型;檢測特異性IgE和IgG水平,脾細胞因子變化,腸道和肺部HE染色病理分析。本研究具有鮮明的中國特色,為家蠶過敏的診斷與治療奠定基礎。
　　方法:
　　1.蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠腸道過敏模型方法:
　　將32只5-6周近親雌性BALB/ c小鼠隨機

2、分為陰性組(PBS組),陽性對照霍亂毒素組(CT組),蠶蛹粗提浸液組(SPE組),霍亂毒素+蠶蛹粗提浸液組(CT+SPE組)每組8只。陰性組灌胃 PBS;陽性組灌胃蠶蛹粗提浸液,間隔3天、共灌胃6次。灌胃激發(fā)3次,灌胃激發(fā)前后測肛溫、觀察致敏狀態(tài);激發(fā)后給腸道致敏模型評分;收集小鼠血清,并收集小鼠脾臟細胞上清,測: sIgE、sIgG2a、細胞因子(IFN-γ、IL-5、IL-4)。小鼠空腸段組織病理變化等指標對模型的構建進行評價。

3、r>　　2.蠶蛹粗提浸液致敏小鼠哮喘模型方法:
　　將16只5-6周近親雌性BALB/c小鼠隨機分為陰性組(PBS組),陽性組(SPE組)每組8只。陰性組腹腔皮下注射PBS;陽性組腹腔注射蠶蛹粗提浸液致敏,連續(xù)3次,每次間隔1周。然后滴鼻激發(fā)一周每天一次。激發(fā)后進行氣道高反應檢測;收集 BALF(肺泡灌洗液)進行細胞計數(shù)、分類。24小時內收集小鼠血清;檢測特異性抗體(IgE)、細胞因子(IL-4、IL-10、INF-γ)以及肺組織

4、病理變化等指標對模型的構建進行評價。
　　結果:
　　1.蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠腸道過敏模型結果:
　　BALB/c小鼠CT+SPE組肛溫變化、過敏狀態(tài)最明顯;家蠶粗提浸液腸道組織病理改變,明顯有炎癥病變;脾細胞培養(yǎng)上清液IL-4、IL-5升高,INF-γ降低;嗜酸性粒細胞升高(P<0.05),陰性組各項指標均無升高。
　　2.蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠哮喘模型結果:
　　家蠶粗提浸液組肺部