DACH1在口腔鱗癌和腺樣囊性癌中的表達及其作用.pdf

1、無限制的快速增殖是惡性腫瘤的主要特征，也是惡性腫瘤侵潤、轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)。在人類腫瘤中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)和鑒定出許多種腫瘤抑制物，如Rb蛋白、P53蛋白等。近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，細胞命運決定因子Dachshund1(DACH1)細胞命運決定因子DACH1作為細胞/腫瘤內(nèi)源性生長抑制物，能夠抑制腫瘤的增殖。DACH1是黑腹果蠅Dachshund(Dac)基因在脊椎動物中的類似物。Dac基因是一種對細胞命運起決定作用的螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋性核蛋白，它在果蠅屬的眼睛

2、以及肢體發(fā)育中起主要作用。DACH1作為一種內(nèi)源性生長抑制物可在哺乳動物的正常組織中表達，作為內(nèi)源性生長抑制物，與激活或轉(zhuǎn)錄的多種復(fù)合物有關(guān);它并通過抑制對細胞遷移、粘附和生長起決定作用的基因的表達，從而抑制細胞的增殖。已有研究表明，在乳腺癌、卵巢癌中，DACH1在調(diào)節(jié)乳腺癌、卵巢癌腫瘤的增殖、侵潤和轉(zhuǎn)移中起重要作用，其中在分化較差的低分化腫瘤中DACH1其表達喪失，而在侵襲性腫瘤中，DACH1的表達較正常組織以及非侵襲性腫瘤均降低。D

3、ACH1在口腔癌中的表達及其作用尚未見報道，基于此我們設(shè)計實驗，研究DACH1基因在口腔癌中的表達及作用。
　　 目的:
　　 檢測細胞命運決定因子DACH1蛋白在口腔鱗癌和腺樣囊性癌組織中的表達，并分析其與臨床、病理特征及患者預(yù)后之間的關(guān)系。另外通過檢測體外培養(yǎng)的鱗癌細胞系Tca8113，人腺樣囊性癌細胞中DACH1的RNA表達水平，探討DACH1在口腔鱗癌和腺樣囊性癌發(fā)生發(fā)展中的作用，以期為口腔鱗癌和腺樣囊性癌的診斷

4、、治療及預(yù)后判斷提供新的依據(jù)。
　　 材料與方法:
　　 1.選取山東大學(xué)齊魯醫(yī)院2009年5月～2012年5月間收治的經(jīng)病理檢查證實的口腔鱗癌患者80例，腺樣囊性癌18例，患者年齡在45～74歲之間，平均年齡為56.3歲。按照病理科診斷其中高分化鱗癌43例，中分化鱗癌27例，低分化鱗癌10例;通過DACH1蛋白在上述不同病理組織中陽性率的比較，及其表達與各臨床病理指標(biāo)之間關(guān)系的比較采用x2檢驗，DACH1蛋白在組織中表

5、達之間的相關(guān)性分析采用Spearman秩檢驗相關(guān)分析。
　　 2.體外培養(yǎng)TCA8113舌鱗癌細胞系，人腺樣囊性癌細胞，穩(wěn)定傳代后并用QIAGEN試劑盒提取總RNA，將總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后用DACH1引物進行（Real-time fluorescence quantitative PCR，RFQ-PCR）實驗，以β-actin作為內(nèi)參通過相對定量法檢測其DACH1轉(zhuǎn)錄mRNA的水平，從細胞分子層面檢驗DACH1的表達。

6、
　　 結(jié)果:
　　 1.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，免疫組織化學(xué)結(jié)果示DACH1蛋白在高分化鱗癌、中分化鱗癌、低分化鱗癌中表達的陽性率依次減低; DACH1蛋白在腺樣囊性癌組織中的表達較鱗癌高。
　　 2.RT-PCR顯示體外培養(yǎng)的TCA8113舌鱗癌細胞系，人腺樣囊性癌細胞的DACH1的mRNA表達水平與參考基因接近，之間沒有差異(p＞0.05)，且兩種細胞之間也未見明顯差異(p＞0.05)。
　　 結(jié)論: