人參總皂苷抑制血管緊張素Ⅱ所致乳鼠心肌細胞肥大.pdf

1、目的：觀察人參總皂苷(total ginsenosides，TG)對血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)所致乳鼠心肌細胞肥大的影響并探討其可能的機制。 方法：成功體外培養(yǎng)SD乳鼠心肌細胞3天后，根據(jù)實驗需要隨機分成正常組、模型組、陽性對照藥精氨酸(L-arg 10-3 mol·L-1)組、TG高劑量(200μg·ml-1)組、TG中劑量(100μg·ml-1)組和TG低劑量(5μg·ml-1)組；同時，另設一組：在

2、正常細胞中加入高劑量TG以觀察有無非特異性干擾；此外，為探討TG的作用與NO釋放的關系，還設TG 200μg·ml-1+NO合酶抑制劑L-NAME 10-3 mol·L-1組和L-arg 10-3 mol·L-1+L-NAME 10-3 mol·L-1組。除正常組和正常細胞+高劑量TG組外，其余各組均加入10-7mol·L-1的AngⅡ以誘導心肌細胞肥大。繼續(xù)培養(yǎng)2天后，以MTT法檢測細胞的活性；HE染色觀察細胞肥大情況并用B12000

3、圖像分析系統(tǒng)測量細胞直徑；采用Bradford蛋白濃度測定試劑盒檢測蛋白含量；Realtime RT-PCR方法檢測心肌細胞心房利鈉因子(ANF)、內皮型一氧化氮合酶(eNOS)、鈣調神經(jīng)磷酸酶(CaN)、細胞外信號調節(jié)激酶1(ERK1)和原癌基因c-myc等mRNA的表達；Western blotting方法檢測心肌細胞鈣調神經(jīng)磷酸酶a-亞基(CnA)和絲裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白質的表達。 結果：10-7

4、mol·L-1 AngⅡ具有明顯的促心肌細胞肥大作用，使心肌細胞腫脹、體積增大、細胞直徑加寬、蛋白含量增加，并使c-myc和ANFmRNA表達明顯上調，表明心肌細胞肥大。AngⅡ還使CaN和ERK1 mRNA表達增強，CnA蛋白表達升高。與模型組比較，TG低、中、高劑量和L-arg預防給藥能明顯改善心肌細胞肥大的各指標(包括ANFmRNA表達)，并使CaN、ERK1mRNA和CnA蛋白表達明顯降低(P＜0.05)；TG還能升高MKP-1