PTEN聯(lián)合多基因突變小鼠腫瘤模型構(gòu)建及小分子抑制劑靶向治療腫瘤干細(xì)胞的研究.pdf

1、保持干細(xì)胞在增殖、分化與凋亡之間的平衡是高等生物維持組織穩(wěn)定的重要方式。這種平衡的打破會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，特別是包括白血病在內(nèi)的眾多腫瘤疾病?，F(xiàn)在研究認(rèn)為白血病的發(fā)生主要是由造血干細(xì)胞發(fā)育中分化過(guò)程的阻斷和細(xì)胞凋亡功能的缺失兩方面原因所導(dǎo)致的。造血干細(xì)胞調(diào)控相關(guān)的基因決定了血液細(xì)胞的分化命運(yùn)，同時(shí)其功能的缺失也被認(rèn)為是白血病發(fā)生的主要致病因素之一。為了進(jìn)一步研究白血病治療機(jī)制，能否建立合適的基因敲除小鼠模型，同時(shí)結(jié)合小分子抑制劑針對(duì)突

2、變基因已靶向治療腫瘤干細(xì)胞的可能仍然是未知的。因此本課題的主要研究?jī)?nèi)容就是：小分子抑制劑的聯(lián)合應(yīng)用在白血病小鼠治療過(guò)程中調(diào)控腫瘤干細(xì)胞的機(jī)制研究。
　　 本文主要取得如下結(jié)果：
　　 第一部分：PTEN缺失以及β-catenin活化可于短期內(nèi)誘導(dǎo)小鼠患T淋巴細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病。
　　 在造血系統(tǒng)中Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在促進(jìn)造血，維持造血干細(xì)胞自我更新，以及促進(jìn)T細(xì)胞正常發(fā)育都發(fā)揮重要作用。P

3、TEN/PI3K/AKT信號(hào)途徑又可調(diào)控干細(xì)胞增殖，凋亡等多項(xiàng)生命過(guò)程。這兩條信號(hào)途徑對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病(acutelymphoidleukemia，ALL)的發(fā)生具有重要的調(diào)控作用。這部分內(nèi)容主要研究了PTEN缺失聯(lián)合β-catenin過(guò)表達(dá)可誘導(dǎo)小鼠T-ALL疾病生成。主要研究?jī)?nèi)容包括：
　　 (1)PTEN缺失以及β-catenin活化在十周內(nèi)可令基因敲除小鼠健康狀況明顯下降；
　　 (2)基因敲除過(guò)程中，T淋巴

4、細(xì)胞惡性增殖是小鼠短期內(nèi)死亡的主要原因；
　　 (3)白血病小鼠外周血，骨髓以及脾臟內(nèi)存在一群腫瘤干細(xì)胞。
　　 第二部分：小分子抑制劑的聯(lián)合使用可減少白血病小鼠體內(nèi)的腫瘤干細(xì)胞。
　　 腫瘤干細(xì)胞能夠耐受多種化療藥物的常規(guī)治療，尋找腫瘤干細(xì)胞治療靶點(diǎn)，抑制因常規(guī)治療而激活增殖的腫瘤干細(xì)胞已經(jīng)成為腫瘤治療的熱點(diǎn)。本課題主要研究了小分子抑制劑在白血病腫瘤干細(xì)胞靶向治療過(guò)程中的調(diào)控和作用。主要研究?jī)?nèi)容包括：
　

5、　 (1)5-FU可增加腫瘤干細(xì)胞數(shù)目，結(jié)合β-cat小分子抑制劑可一定程度減少腫瘤干細(xì)胞數(shù)目，并可維持外周血內(nèi)髓細(xì)胞以及血小板濃度；
　　 (2)地塞米松結(jié)合β-cat以及pi3k小分子抑制劑可減少腫瘤干細(xì)胞數(shù)目，同時(shí)保護(hù)骨髓內(nèi)正常造血干細(xì)胞；
　　 (3)地塞米松結(jié)合β-cat以及pi3k小分子抑制劑治療腫瘤干細(xì)胞的機(jī)制。
　　 第三部分：結(jié)腸癌小鼠模型的建立以及COX-2抑制劑聯(lián)合5FU化療藥物對(duì)結(jié)腸癌治

6、療的初步研究。
　　 腸癌發(fā)生與發(fā)展是多步驟多因素的復(fù)雜過(guò)程。抑癌基因PTEN的丟失和Apc基因的雜合性缺失都會(huì)啟動(dòng)癌變程序，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞惡性增殖。常規(guī)化療手段難以徹底根除腸癌，腫瘤復(fù)發(fā)率高。本部分內(nèi)容主要研究建立新穎的PTEN敲除apcmin突變小鼠模型以模擬臨床上可行的腫瘤靶向治療方案，提供研究腫瘤干細(xì)胞治療的理論基礎(chǔ)。研究?jī)?nèi)容如下：
　　 (1)通過(guò)PTEN敲除以及Apcmin位點(diǎn)突變，誘導(dǎo)小鼠生成小腸息肉與腺癌；