靶向腫瘤相關重要蛋白BRD4和RHOA小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)及作用機制的研究.pdf

1、近年來，隨著生物醫(yī)藥領域的迅猛快速發(fā)展，靶向特定蛋白篩選其特異性的小分子抑制劑已成為該領域的重點。本文中著眼于表觀遺傳相關蛋白及細胞骨架類蛋白這兩個不同的領域中的重要蛋白進行小分子抑制劑的篩選。
　　組蛋白乙?；鳛楸碛^遺傳學中重要的一類翻譯后修飾，在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄與染色體構(gòu)成等多個領域中發(fā)揮著重要的作用，并且與癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關，因此，組蛋白乙?；殉蔀閲鴥?nèi)外的研究熱點。BRD4蛋白作為組蛋白乙?；R別因子”reader”，是

2、屬于BET家族的一員，它能夠特異性結(jié)合乙?；揎椀馁嚢彼?，并招募其他轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控BCL2，CDK6，c-Myc等下游致癌基因。目前研究表明，BRD4的異常表達與MLL，AML等白血病以及睪丸中腺癌等眾多疾病相關，因此靶向BRD4蛋白篩選小分子抑制劑是十分有必要的，在本文中，我們利用BRD4蛋白可以識別乙?；馁嚢彼徇@一原理，結(jié)合AlphaScreen技術靈敏均相無放射性等優(yōu)點，我們建立了BRD4的“HITs”篩選平臺，初步篩選得到了一類

3、骨架新穎，活性較好的小分子抑制劑，該小分子在體外可以在0.81土0.03 uM左右顯著抑制BRD4蛋白識別乙?；慕M蛋白，不僅如此該化合物在細胞水平還可以抑制血液病細胞的增殖等，因此其是一個潛在的成藥的小分子。
　　RhoA作為GTP酶的一種，是重要的細胞信號通路轉(zhuǎn)導因子，并影響細胞骨架的形態(tài)等，屬于小G蛋白家族的一員。RhoA與上游的三種蛋白相互作用，并受這三種蛋白的調(diào)控，從而在RhoA-GTP活性狀態(tài)及RhoA-GDP非活性狀