PDGF對大鼠脊髓損傷后保護作用的初步研究.pdf

1、目的 探討外源性PDGF對大鼠脊髓損傷后的神經(jīng)保護作用及其可能機制，為脊髓損傷的治療提供新思路、新方法。 方法： 取SD大鼠90只，雌雄各半，先每4只放一籠內(nèi)適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。隨機分為假損傷組（A組）30只、脊髓損傷生理鹽水干預(yù)組（B組）30只以及脊髓損傷PDGF干預(yù)組（C組）30只，其中假損傷組只打開椎管，不打擊脊髓，脊髓損傷組應(yīng)用Allen’法制作SCI模型。采用改良Gale聯(lián)合評分法（改良CBS評分法）對每只

2、大鼠分別在術(shù)前1天，術(shù)后第1天、第7天及第14天四個時相點進行評分，采用雙人、雙盲的方法，獨立觀察大鼠雙后肢的運動功能并記錄。每組分別于移植術(shù)后3d、7d、14d三個時相點處死3只大鼠進行灌注、取材、HE染色，行組織學(xué)觀察；用透射電鏡觀察神經(jīng)元的凋亡、壞死情況。每組分別于移植術(shù)后1h、6h、24h三個時相點處死3只大鼠進行灌注、取材、行免疫組織化學(xué)染色并在光學(xué)顯微下觀察，計數(shù)Fos免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元（fos-like immunorea

3、ctivity neurons，F(xiàn)LIN）。 結(jié)果： 1、在行為學(xué)觀察中，B組與C組相比，在各時相點差別均有顯著性意義（P<0.05）。 2、HE染色：B組在脊髓損傷后3天，灰、白質(zhì)中出現(xiàn)片狀出血，神經(jīng)元腫脹、破裂、溶解；損傷后7天，損傷壞死區(qū)有膠質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞、淋巴細胞增生；傷后14天增生更加明顯。C組：組織破壞較B組輕，在脊髓損傷后14天，損傷壞死區(qū)膠質(zhì)細胞較較B組明顯增加。電鏡：B組術(shù)后1周神經(jīng)元變形，胞

4、漿內(nèi)線粒體明顯腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，神經(jīng)纖維的髓鞘不完整，板層松解，呈空泡樣變，線粒體腫脹，微管、微絲不清楚；2周時上述改變加重。C組術(shù)后基本正常，2周時線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度腫脹，神經(jīng)纖維的髓鞘較完整，損害輕，微管、微絲清晰可見，神經(jīng)元基本正常。SCI后通過透射電鏡可以觀察到神經(jīng)元的凋亡與壞死表現(xiàn)； 3、在大鼠脊髓損傷后1h和24 h時C-fos表達最為顯著，6h時明顯減少，C組與B組行組間配對比較，在術(shù)后各時相點差別均有顯著性意