Neuroserpin對大鼠急性脊髓損傷后神經(jīng)功能的修復(fù)作用及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的:通過對腦源性神經(jīng)生長因子BDNF、膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)生長因子GDNF、軸突生長抑制因子Nogo-A等在基因和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)情況的檢測，來評估神經(jīng)絲氨酸蛋白酶抑制劑(neuroserpin，NSP)對急性脊髓損傷大鼠進(jìn)行干預(yù)后大鼠的神經(jīng)功能的恢復(fù)情況并對其機(jī)制進(jìn)行初步探索。
　　方法:成年雄性SD大鼠隨機(jī)分成三組。A.脊髓損傷(SCI)組:60只。用改良Allen's重物打擊法制備急性脊髓損傷模型，以30g.cm致傷力損傷大鼠

2、T11對應(yīng)脊髓，鞘內(nèi)注射生理鹽水25μ l。B.NSP組:60只。大鼠急性脊髓損傷后立即鞘內(nèi)注射NSP25μ L。C.正常對照組:10只。只去除椎板，暴露脊髓，不造成SCI。各組定期行為學(xué)觀察（BBB評分），western blot檢測脊髓損傷局部GDNF、Nogo-A的表達(dá)，realtime PCR檢測脊髓損傷局部BDNF、GDNF、Nogo-A的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:隨時間延長，術(shù)后SCI組和NSP組大鼠BBB評分均逐漸升高，

3、但是兩組并無明顯差異。
　　Western blot顯示:在正常成年大鼠脊髓內(nèi)GDNF表達(dá)很少，急性脊髓損傷后1d GDNF表達(dá)明顯升高，隨時間延長，其表達(dá)量逐漸降低，14d時稍微高于正常對照組，同時，在1d、3d、7d、14d各時間點(diǎn)NSP組GDNF表達(dá)量均高于SCI組。Nogo-A在正常成年大鼠脊髓內(nèi)的表達(dá)量也是比較少，急性脊髓損傷后其表達(dá)成逐漸升高趨勢，14d時表達(dá)最強(qiáng)，同時，NSP組在各時間點(diǎn)的Nogo-A表達(dá)量均低于SC

4、I組。
　　Realtime PCR顯示:BDNF在正常組表達(dá)極少，脊髓損傷1d后表達(dá)水平顯著提高，隨時間推移，表達(dá)水平逐漸下降，但總是高于正常組，同時，NSP組在1d、3d、7d、14d各時間點(diǎn)BDNF水平均明顯低于SCI組;GDNF在正常組表達(dá)極少，脊髓損傷1d后表達(dá)水平顯著提高，隨時間推移，表達(dá)水平逐漸下降，但總是高于正常組，同時，NSP組在1d、3d、7d各時間點(diǎn)GDNF水平均明顯高于SCI組;Nogo-A在正常組少量表達(dá)