富氫鹽水對大鼠脊髓損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討蛛網(wǎng)膜下腔局部灌注富氫鹽水對脊髓損傷(SCI)的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。本研究為富氫鹽水治療脊髓損傷提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)，也為富氫鹽水今后用于脊髓損傷的藥物治療提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:取SD大鼠75只(重量200-250g)，采用完全隨機(jī)法將SD大鼠隨機(jī)分為三組:A組;B組（SCI后氫水干預(yù)組）;C組（SCI后生理鹽水對照組），每組25只。又根據(jù)不同觀察時(shí)間6h、24h、48h、1w、2w把A、B組和C組隨機(jī)各分為A1、

2、A2、A3、A4、A5;B1、B2、B3、B4、B5和C1、C2、C3、C4、C5組，每小組5只。B、C組采用改良Allen's撞擊法建立脊髓損傷模型并置硬膜內(nèi)導(dǎo)管。A組打開椎板后不損傷脊髓，行蛛網(wǎng)膜下腔導(dǎo)管置管。各組大鼠術(shù)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)行BBB評分后，取相應(yīng)脊髓組織行HE染色病理學(xué)觀察、行降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）免疫組化染色對平均OD(optical density)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;并通過免疫組化法對含半胱氨酸的門冬氨酸特異水解酶-

3、3(Caspase-3)進(jìn)行檢測，對陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)處死前行心臟抽血查丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1.運(yùn)動功能評定（BBB評分法）:A組各組評分均為正常的21分;術(shù)后24h、48h、1w、2w，B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的評分高于C組(P＜0.05)。
　　2.HE染色:A組細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，脊髓組織結(jié)構(gòu)致密，細(xì)胞核顯染且居中，核仁顯染。SCI后C1較B1組炎癥反應(yīng)嚴(yán)重;

4、C2組較B2組炎癥反應(yīng)嚴(yán)重，B3組神經(jīng)元萎縮且炎性反應(yīng)較C3組輕;B4組較C4組神經(jīng)元萎縮輕;B5組較C5組疤痕形成少。
　　3.CGRP OD值:術(shù)后24h、48h、1w、2W，B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的OD值高于C組(P＜0.05)。
　　4.MDA水平檢測:術(shù)后24h、48h、1w、2w，C組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的MDA水平高于B組(P＜0.05)，且B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的MDA水平高于A組(P＜0.05)。
　　5.SOD水平檢測

5、:術(shù)后24h、48h、1w、2w，B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的SOD水平高于C組(P＜0.05)。
　　6.Caspase-3免疫組化檢測:術(shù)后24h、48h、1w、2w，C組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Caspase-3的陽性細(xì)胞數(shù)目高于B組(P＜0.05)，且B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Caspase-3的陽性細(xì)胞數(shù)目高于A組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.富氫水通過減輕脊髓損傷早期氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，后期通過增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，進(jìn)而抑制細(xì)