MMP-9和TIMP-1在硬皮病模型鼠皮膚硬化過程中的作用以及辛伐他汀對硬皮病模型鼠皮膚硬化影響的實驗研究.pdf

1、目的：探討MMP-9和TIMP-1在硬皮病模型鼠皮損纖維化形成中的作用以及辛伐他汀對硬皮病小鼠模型膠原合成、MMP-9和TIMP-1表達的影響。 方法：每日用博萊霉素(0.5mg/ml)0.1ml在小鼠背部皮下注射.并給予相應(yīng)處理，按實驗設(shè)計定時收集標(biāo)本，采用HE染色觀察皮膚組織變化特點，比色法檢察皮損羥脯氨酸含量，RT-PCR檢測小鼠硬皮病皮損前膠原(pro-COL1a1)mRNA表達水平以及Western blot檢測MMP

2、-9和TIMP-1表達情況。 結(jié)果：與對照組比較，硬化鼠模型皮損內(nèi)MMP-9蛋白表達水平在第1-2周明顯升高，第3-4周，仍有緩慢增加。而從第1周至第4周， TIMP-1蛋白表達水平隨著時間的延長逐漸升高，第4周達頂峰；且TIMP-1表達與皮損硬化程度(羥脯氨酸含量)相平行.早期給藥組中，模型組與陰性對照組比較，小鼠真皮內(nèi)膠原增粗，表真皮厚度、羥脯氨酸含量、proCOL1a1 mRNA以及SSP-9和TIMP-1蛋白表達明顯增加

3、(P<0.01)；而5mg/kg.d辛伐他汀處理組較模型組小鼠真皮厚度變薄(P<0.05)，羥脯氨酸含量降低(P<0.01)，皮損pro-COL1a1 mRNA、MMP-9和TIMP-1表達下降(P<0.05)。硬化后給藥組中，辛伐他汀處理組與空白對照組比較小鼠真皮厚度、羥脯氨酸含量以及MMP-9和TIMP-1均無明顯改善，但pro-COL1a1 mRNA表達下降(P<0.05)。 結(jié)論：在博萊霉素誘導(dǎo)的硬皮病小鼠模型中，皮損早

4、期以炎癥浸潤為主，晚期則以纖維化為主；MMP-9可能主要在早中期參與了硬皮病鼠模型皮膚硬化過程中細(xì)胞外基質(zhì)膠原重構(gòu)，而TIMP-1主要在中晚期在皮膚硬化/纖維化過程中發(fā)揮重要作用。無論早期還是硬化后給藥，辛伐他汀均能抑制COL1a1 mRNA的表達；早期予以辛伐他汀處理可以減少膠原合成和MMP-9和TIMP-1表達，減輕博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠皮膚硬化程度。硬化后予以辛伐他汀處理則對MMP-9和TIMP-1表達無明顯影響，皮膚硬化改善不明顯。