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1、丙型肝炎病毒(HCV)感染是一種嚴(yán)重危害人類健康的重要病毒性疾病,已知在80%感染患者引起慢性肝炎,其中超過20%的病人可進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化和肝癌.目前已知丙型肝炎病毒(HCV)1b型在致病性和轉(zhuǎn)歸上又較1a型嚴(yán)重.鑒于病毒基因編碼的NS3蛋白酶為病毒成熟所必需,NS3區(qū)基因在不同亞型間的變異比較大,又與HCV的致癌性相關(guān),推測(cè)型別間NS3蛋白酶活性的差異可能是導(dǎo)致上述現(xiàn)象的一個(gè)原因.該文對(duì)此設(shè)想進(jìn)行了探索,首先在細(xì)胞系統(tǒng)中對(duì)蛋白酶活性
2、在轉(zhuǎn)歸不同的亞型間的差異進(jìn)行了驗(yàn)證;在發(fā)現(xiàn)1a、1b兩亞型NS3蛋白酶存在活性差異的基礎(chǔ)上對(duì)其結(jié)構(gòu)學(xué)基礎(chǔ)進(jìn)行了分析,并對(duì)兩亞型NS3蛋白酶對(duì)細(xì)胞功能的影響及影響蛋白酶的可能宿主細(xì)胞蛋白進(jìn)行了研究.該文建立了一種通過檢測(cè)NS3/4A-SEAP表達(dá)細(xì)胞上清SEAP水平評(píng)價(jià)細(xì)胞內(nèi)NS3蛋白酶活性的方法,并證明可用于篩選抗NS3抑制劑及研究不同亞型HCV的致病機(jī)理;研究了存在于1a、1b兩型蛋白酶間活性差異的機(jī)制,發(fā)現(xiàn)是多個(gè)氨基酸改變?cè)诳臻g上的
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