Rho激酶在腸缺血再灌注肺損傷中的作用及法舒地兒預(yù)處理的保護(hù)研究.pdf

1、背景：腸缺血再灌注（intestine ischemia reperfusion，IIR）損傷是臨床外科常見(jiàn)的組織器官損傷之一，不僅見(jiàn)于腸梗阻、腸系膜動(dòng)脈栓塞等急腹癥，更是嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷后休克復(fù)蘇中出現(xiàn)的病理過(guò)程，其可導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞死亡，腸黏膜屏障破壞，腸通透性增加，使內(nèi)毒素吸收增加及細(xì)菌移位至體循環(huán)，進(jìn)而導(dǎo)致大量相關(guān)介質(zhì)和細(xì)胞因子的釋放，導(dǎo)致遠(yuǎn)隔器官的損傷，甚至全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory respo

2、nse syndrome，SIRS）和多器官功能不全綜合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）。其中以肺損傷所致的急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）尤為突出，病死率亦很高。Rho激酶（Rho相關(guān)卷曲螺旋形成蛋白的激酶）是小G蛋白R(shí)ho下游重要的靶效應(yīng)分子，參與平滑肌收縮，細(xì)胞遷徙等多種生理功能，同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)Rho激酶參與機(jī)體的炎癥反應(yīng)。因此Rho激酶的激活可能在肺損傷的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。

3、 鹽酸法舒地兒（Hydrochloride Fasudil，HF）：六氫-1-（5-磺?；?1（H）-1，4-二氮雜卓。HF是一種蛋白酶抑制劑，通過(guò)抑制Rho激酶從而抑制炎細(xì)胞的遷徙和浸潤(rùn)，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生；增加清除氧自由基及抗氧化的能力；增加eNOS的表達(dá)，提高eNOS的活性，增加NO的產(chǎn)量，在IIR過(guò)程中可能重要發(fā)揮保護(hù)作用。 目的：探討Rho激酶在IIR所致肺損傷機(jī)制中的作用及法舒地兒預(yù)處理處理對(duì)IIR肺損傷的

4、保護(hù)作用，并為為法舒地兒的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：將健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、HF預(yù)處理高劑量組（15mg/kg）及HF預(yù)處理低劑量組（7．5 mg/kg）。用無(wú)創(chuàng)小血管夾夾閉腸系膜上動(dòng)脈（superior mesenteric artery，SMA）1h、再灌注2h，建立腸缺血再灌注損傷模型。術(shù)前60min，HF預(yù)處理組注射鹽酸法舒地兒；正常對(duì)照組僅行剖腹術(shù)及SMA分離術(shù)，并給予等劑量生理鹽水。再灌注結(jié)束，

5、取血、肺及腸組織。光鏡下觀察病理石蠟切片肺、腸組織形態(tài)學(xué)改變，測(cè)定肺、小腸組織中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力和髓過(guò)氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活力，檢測(cè)血清中肌酸激酶-B（creatine kinase-B，CK-B）水平，腫瘤壞死因子-α（tumor necrosisfactor-α，TNF-α）和白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的水平，通過(guò)West

6、ern-blotting檢測(cè)肺、小腸組織中eNOS和P-Moesin蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果：IIR后， 1）與對(duì)照組相比，模型組組織學(xué)形態(tài)見(jiàn)小腸及肺損傷較嚴(yán)重，血清中CK-B，TNF-α以及IL-6水平升高（P<0．01，P<0．01），小腸和肺組織中MPO活性顯著升高而SOD活性顯著降低，（P<0．01，P<0．01），同時(shí)小腸和肺組織中組織中eNOS表達(dá)明顯減弱，而P-Moesin表達(dá)增強(qiáng)。 2）HF預(yù)處理后

7、與模型組相比組織學(xué)形態(tài)見(jiàn)腸，肺損傷有所減輕，肺泡灌洗液蛋白含量有所減低（P<0．01），血清中CK-B，TNF-α以及IL-6水平有所降低，MPO活性明顯下降（P<0．01），SOD活性明顯升高（P<0．01），eNOS表達(dá)增高（P<0．01），p-Moesin表達(dá)減弱（P<0．01）。 結(jié)論： 1）小腸缺血再灌注可以導(dǎo)致嚴(yán)重的肺損傷。 2）腸缺血再灌注肺損傷機(jī)制復(fù)雜，其發(fā)生和發(fā)展與Rho激酶的激活有關(guān)。