骨橋蛋白在血管平滑肌細胞中表達與腹主動脈瘤發(fā)生的相關性.pdf

1、背景：骨橋蛋白是（osteopontin；OPN）一種由多種細胞分泌的磷酸化糖蛋白，在正常的動脈壁中幾乎不表達，它是細胞外基質(zhì)（extracellular matrix；ECM）中一種重要的功能性蛋白和促炎因子，可調(diào)節(jié)血管平滑肌細胞(Vascular smooth muscle cells；VSMC)的增殖、遷移，并參與VSMC表型轉(zhuǎn)變。近年研究發(fā)現(xiàn)，VSMC是腹主動中膜的主要組成成份，其數(shù)目減少、表型轉(zhuǎn)變和細胞外基質(zhì)的改變是形成腹主動

2、脈瘤（abdominal aortic aneurysm；AAA）的重要因素。OPN可促進VSMC的凋亡，進而引起動脈壁結構改變，而AAA組織中VSMC凋亡也十分明顯；同時有文獻證實骨橋蛋白在人AAA中高表達，本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn)OPN無論是在人AAA還是在大鼠AAA模型中均有高表達。然而，OPN在平滑肌細胞中是否表達、是否起作用、是否參與AAA的形成及其中涉及的分子機制尚不明確？因此本研究主要探討醛固酮（Aldosterone；Al

3、d）及血管緊張素II(AngiotensinⅡ；AngII）誘導血管平滑肌細胞中骨橋蛋白表達是否參與到AAA的形成？
　　目的：研究VSMC是否分泌并表達OPN；Ald和AngII對OPN表達及其涉及的信號通路中各因子表達的影響；初步驗證OPN在VSMC中是否表達、是否起作用、是否參與AAA的形成？
　　方法：培養(yǎng)大鼠腹主動脈VSMC，用免疫印跡（Western blot）法檢測OPN、p-P38、p-ERK等表達量；用免疫

4、組化法檢測VSMC中OPN和炎癥介質(zhì)MMP-2、MMP-9的表達情況；用細胞計數(shù)法和MTT試劑盒檢測藥物對VSMC增殖的影響。
　　結果：（1）VSMC分泌并表達低水平的OPN；（2）MTT和細胞計數(shù)均顯示：Ald、AngII可促進VSMC細胞的增殖。（3）Ald和AngII均可刺激VSMC中ERKl/2、P38發(fā)生磷酸化，引起p-ERK、p-P38表達增加；MAPKK特異性抑制劑PD98059、p38 MAPK特異性抑制劑SB2

5、03580，可以抑制Ald、AngII誘導的OPN，MMPs表達及分泌。（3）免疫組化結果示：Ald、AngII可誘導VSMC中OPN高表達，同時上調(diào)MMP-2，MMP-9的表達及分泌,同時PD98059和SB203580可降低Ald、AngII的誘導作用。
　　結論：（1）VSMC表達并分泌低水平的0PN。（2）Ald、AngII可促進VSMC的增殖。（3）ERK和p38 MAPK信號傳導通路系統(tǒng)參與Ald、AngII誘導OPN