版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:原發(fā)性高血壓是一種遺傳因素和環(huán)境因素共同引起的多基因遺傳病,具有種族差異、外顯遲滯和異質(zhì)性等特征。內(nèi)收蛋白是由α、β、γ3種亞單位構(gòu)成的異源二聚體或異源四聚體,它的異型分子在紅細(xì)胞、腦、肺、腎、肝臟等組織中均已檢出。內(nèi)收蛋白三個(gè)亞單位結(jié)構(gòu)相近均可分為氨基端球形頭部,頸部和羧基端尾部。其中α-內(nèi)收蛋白受Ca2+/鈣調(diào)蛋白、蛋白激酶C和蛋白激酶A的調(diào)節(jié),參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。此外,α-內(nèi)收蛋白還與膜骨架的其他成分(如spectrin和ac
2、tin等)及多種膜蛋白(如離子通道、交換體和離子泵等)相互作用,參與細(xì)胞膜離子轉(zhuǎn)運(yùn),尤其與多種細(xì)胞膜Na+轉(zhuǎn)運(yùn)、Na+-H+交換、Na+-K+-Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)、Na+-Li+反轉(zhuǎn)運(yùn)及鈉泵活性密切相關(guān),進(jìn)而影響血壓。人類(lèi)α-內(nèi)收蛋白定位于4號(hào)染色體(4p16.3),第10個(gè)外顯子存在G614T單核苷酸多態(tài)性,導(dǎo)致編碼該蛋白的460位甘氨酸(Gly)被色氨酸(Trp)替換。本實(shí)驗(yàn)以我國(guó)北方漢族人群為研究對(duì)象,采用PCR-RFLP和DNA
3、序列測(cè)定等方法,對(duì)α-內(nèi)收蛋白基因第10外顯子部分DNA序列進(jìn)行分析,進(jìn)一步明確我國(guó)北方漢族人α-內(nèi)收蛋白基因Gly460Trp多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的關(guān)系。 方法:以160例北方漢族原發(fā)性高血壓患者和1 51例血壓正常者為研究對(duì)象,血壓測(cè)量采用校正的汞柱式血壓計(jì),測(cè)量上臂血壓,患者測(cè)血壓前15分鐘不吸煙,背靠靜坐5分鐘;入選前測(cè)量非同日3次血壓,取平均值;血壓測(cè)量在標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下進(jìn)行,即每天同一時(shí)間、同側(cè)臂、用相同血壓計(jì)、由同一測(cè)量
4、人完成。入選標(biāo)準(zhǔn)為2005年我國(guó)高血壓防治指南:有明確原發(fā)性高血壓病史并且已服用抗高血壓藥物治療者;未服用抗高血壓藥物,且非同日2次測(cè)得收縮壓≥140mmHg和/或舒張壓≥90mmHg,排除繼發(fā)性高血壓、糖尿病、冠心病、高脂血癥、嚴(yán)重肝腎功能障礙者。其入選者為滿(mǎn)足上述原發(fā)性高血壓入選標(biāo)準(zhǔn),且無(wú)高血壓家族史,排除繼發(fā)性高血壓、糖尿病、冠心病、高脂血癥、嚴(yán)重肝腎功能障礙者,入選的各個(gè)研究對(duì)象之間無(wú)親緣關(guān)系。登記每個(gè)研究對(duì)象的一般臨床資料并檢
5、測(cè)相關(guān)生化指標(biāo),包括:性別、年齡、家族史、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。所有研究對(duì)象需空腹12小時(shí)以上,于清晨取坐位采血,采集肘正中靜脈血。各血樣按相應(yīng)生化指標(biāo)檢測(cè)要求做預(yù)處理:離心、分離上清,置于-80℃超低溫冰箱保存等,待標(biāo)本收集完成后同批測(cè)定,以減小批間誤差。用含有抗凝劑的真空抽血管另外抽2ml靜脈血,充分混勻后置于-80
6、℃超低溫冰箱保存,用于基因組DNA的提取。 采用傳統(tǒng)的酚/氯仿抽提法,從外周血白細(xì)胞中提取基因組DNA,采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-RFLP)方法檢測(cè)α-內(nèi)收蛋白第10外顯子基因G614T(G為鳥(niǎo)嘌呤,T為胸腺嘧啶)的基因多態(tài)性,試劑主要有:磷酸緩沖溶液(PBS)、蛋白酶K(Pro Nalse K)、抽提Buffer、Tris飽和酚、氯仿、異戊醇、無(wú)水乙醇等。其他實(shí)驗(yàn)試劑和儀器有:聚合酶鏈反應(yīng)引物(上海生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司)、
7、dNTPs(北京賽百盛基因技術(shù)有限公司)、DNA marker、RedTaq DNA聚合酶(北京賽百盛基因技術(shù)有限公司)、12%聚丙烯酰胺膠(PAG)、限制性?xún)?nèi)切酶(北京紐英倫生物技術(shù)有限公司)、英國(guó)HybaidExpress全自動(dòng)擴(kuò)增儀、美國(guó)Kodak凝膠成像系統(tǒng)。所有數(shù)據(jù)采用SAS 6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析?;蝾l率采用基因計(jì)數(shù)法,等位基因頻率比例采用卡方檢驗(yàn),計(jì)量資料均以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示,計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)表示。Hardy-Wei
8、nberg平衡檢驗(yàn)、組間基因型及等位基因頻率的比較用四格表x2檢驗(yàn);不同基因型的血壓及指標(biāo)差異采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:1.一般臨床資料及生化指標(biāo)比較:兩組間在平均年齡、TC、LDL-C、HDL-C、TG方面無(wú)顯著差異(P>0.05):原發(fā)性高血壓組與正常對(duì)照組相比SBP、DBP水平均高于后者有顯著性差異(P<0.05),因此具有可比性。 2.經(jīng)卡方檢驗(yàn)各組基因型分布均符合Hardy-
9、Weinberg遺傳平衡定律,說(shuō)明該研究人群具有代表性。 3.α-內(nèi)收蛋白基因Gly460Trp多態(tài)性在EH組與對(duì)照組中,三種基因型構(gòu)成比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);等位基因頻率差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.GlyTrp和TrpTrp基因型者收縮壓水平高于GlyGly基因型患者(P<0.05);GlyTrp基因型患者舒張壓水平高于GlyGly和TrpTrp基因型者(P<0.05)。 結(jié)論:我國(guó)北
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- α-內(nèi)收蛋白基因與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)研究.pdf
- eNOS基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓關(guān)系的研究.pdf
- C-反應(yīng)蛋白基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性研究.pdf
- 原發(fā)性高血壓與α-Adducin P460Trp突變的相關(guān)性研究.pdf
- 內(nèi)皮素—1基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的關(guān)系.pdf
- 原發(fā)性高血壓患者β-,2-腎上腺素受體Arg16Gly多態(tài)性的研究.pdf
- 醛固酮合酶基因多態(tài)性與老年原發(fā)性高血壓的關(guān)系
- AT2R基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性研究.pdf
- ANP和BNP基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)性研究.pdf
- Foxp3基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓相關(guān)性分析.pdf
- 腎素-血管緊張素系統(tǒng)基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓.pdf
- ACE基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓及左心室肥厚的關(guān)系.pdf
- 內(nèi)皮素-1基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)性分析.pdf
- 原發(fā)性高血壓與apelin-APJ通路基因多態(tài)性的相關(guān)研究.pdf
- 廣東粵北地區(qū)瑤族載脂蛋白E基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的關(guān)系.pdf
- Gs蛋白α-亞基因T393C多態(tài)性與原發(fā)性高血壓病的關(guān)系.pdf
- α-adducin基因、ACE基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓患者腎臟損害的相關(guān)性研究.pdf
- G蛋白β3亞單位基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓胰島素抵抗的相關(guān)性.pdf
- β-,1-腎上腺素能受體Arg389Gly多態(tài)性與原發(fā)性高血壓關(guān)系的研究.pdf
- ACE基因I-D多態(tài)性與家族性原發(fā)性高血壓的相關(guān)分析.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論