Ref-1和NF-κB在氨基苷類抗生素耳蝸氧化損傷調(diào)控機(jī)制中的作用.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文Ref1和NFκB在氨基苷類抗生素耳蝸氧化損傷調(diào)控機(jī)制中的作用姓名：代洪申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：伍偉景20070501博士學(xué)位論文中文摘要毛細(xì)胞無(wú)明顯缺失，各實(shí)驗(yàn)組外毛細(xì)胞缺失程度從重到輕依次為：慶大霉素14日組慶大霉素水楊酸鈉14日組慶大霉素7日組慶大霉素水楊酸鈉7日組，各組間外毛細(xì)胞計(jì)數(shù)有顯著差異(P005)。(3)耳蝸切片免疫組化：對(duì)照組耳蝸螺旋器和螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞Ref1呈弱陽(yáng)性表達(dá)，主要

2、表達(dá)于細(xì)胞漿；慶大霉素7日組耳蝸RefI表達(dá)增強(qiáng)，并有較多胞核著色的細(xì)胞；慶大霉素水楊酸鈉7日組呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，主要表達(dá)于細(xì)胞核；慶大霉素14日組陽(yáng)性表達(dá)程度較慶大霉素7日組弱，胞核陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)較少；慶大霉素水楊酸鈉14日組陽(yáng)性表達(dá)程度介于慶大霉素7日組和14日組之問(wèn)。各組灰度值有顯著性差異(Po01)。(4)WesternBlot檢N內(nèi)參照pactin表達(dá)穩(wěn)定。對(duì)照組耳蝸Ref1蛋白有低強(qiáng)度表達(dá)；慶大霉素7日組表達(dá)明顯增強(qiáng)，慶大霉素水

3、楊酸鈉7日組表達(dá)最強(qiáng)；慶大霉素14日組表達(dá)輕度增強(qiáng)，慶大霉素水楊酸鈉14日組表達(dá)介于慶大霉素7日組和14日組之間。各組間蛋白電泳積分光密度值有顯著性差異(P001)。(5)RTPCR檢測(cè)：抽提耳蝸組織總RNA電泳結(jié)果OI)260／280在19～20之間。對(duì)照組耳蝸Ref1mRNA有低強(qiáng)度表達(dá)；慶大霉素7日組表達(dá)強(qiáng)度明顯增加，慶大霉素水楊酸鈉7日組表達(dá)強(qiáng)度最高；慶大霉素14日組表達(dá)輕度增強(qiáng)，慶大霉素水楊酸鈉14日組表達(dá)介于慶大霉素7日組和

4、14日組之間。各組mRNA電泳積分的光密度值有顯著性差異(Po01)。結(jié)論Ref1在正常豚鼠耳蝸螺旋器和螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的胞漿中輕度表達(dá)。慶大霉素給藥后早期耳蝸中Ref1蛋白和mRNA表達(dá)上調(diào)，并在部分細(xì)胞自胞漿向胞核內(nèi)移位。同時(shí)給予抗氧化劑水楊酸鈉可進(jìn)一步促使Ref1由胞漿向核內(nèi)移位并顯著增強(qiáng)其mRNA和蛋白表達(dá)。各實(shí)驗(yàn)組Ref1蛋白和mRNA的表達(dá)水平與外毛細(xì)胞數(shù)量及聽功能保存程度一致。上述結(jié)果提示在慶大霉素導(dǎo)致耳蝸損害的過(guò)程中，Re