神農(nóng)霉素Ⅱ號組分高產(chǎn)菌株育種與發(fā)酵工藝研究.pdf

1、神農(nóng)霉素產(chǎn)生菌是吸水鏈霉菌應(yīng)城變種(Streptomyces hygroscopicus var.yingchengensis Yan et Ruan.n.var)5102菌株的一個(gè)突變株.神農(nóng)霉素是一種抗植物真菌病害的新農(nóng)用抗生素.本文對神農(nóng)霉素Ⅱ號組分進(jìn)行了化學(xué)定量方法的研究.結(jié)果表明用HPLC法分析時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度在21.2 μ g/gl-846.0 μ g/ml范圍內(nèi)分析結(jié)果有較好的線性關(guān)系.其相關(guān)系數(shù)、變異系數(shù)、回收率分別為0

2、.99947、0.108﹪、97.60-100.23﹪.運(yùn)用六種誘變育種方法對神農(nóng)霉素產(chǎn)生菌進(jìn)行誘變處理,篩選高產(chǎn)菌株.通過HPLC法測定效價(jià),最后得到一株活性是原始菌株4.0倍的誘變株H-191-1-1,效價(jià)為212.4 μ g/ml(原始菌株Z009,效價(jià)為53.7 μ g/ml).通過對各種育種方法的比較得到:紫外線、微波、N+離子注入對神農(nóng)霉素產(chǎn)生菌誘變效果相對較好.對高產(chǎn)菌株D-81-7進(jìn)行了搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基篩選和最佳發(fā)酵條件的

3、研究.對培養(yǎng)基配方進(jìn)行了單因子實(shí)驗(yàn),篩選出最佳的碳源和氮源.對培養(yǎng)基各組成成分進(jìn)行了正交實(shí)驗(yàn),找到最佳配比.還對pH、溫度、無機(jī)鹽、搖瓶裝量等發(fā)酵工藝條件分別進(jìn)行了探索.得出最佳培養(yǎng)基配方為:玉米淀粉6﹪魚粉1.8﹪黃豆餅粉0.8﹪KH<,2>PO<,4> 0.1﹪ NaCl 0.15﹪ CaCO<,3>0.4﹪.消前pH7.3-7.5,溫度28-30℃,搖瓶裝量30ml/150ml,發(fā)酵效價(jià)最高.通過發(fā)酵罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)得到:在我所做實(shí)驗(yàn)條