轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達(dá)及多態(tài)性與乳腺癌關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、人類基因組研究計(jì)劃的研究成果提示基因內(nèi)部存在大量的多態(tài)性（polymorphism），這些多態(tài)性廣泛影響著人類生理機(jī)能以及多種疾病和腫瘤的發(fā)生，對(duì)疾病及腫瘤基因多態(tài)性的研究已經(jīng)成為功能基因組時(shí)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域又一焦點(diǎn)?；蚨鄳B(tài)性是指DNA序列中自然存在的多種變異形式：如單核苷酸置換，單個(gè)或者多個(gè)堿基的丟失或插入，堿基重復(fù)序列數(shù)目的改變和染色體結(jié)構(gòu)的改變。在基因多態(tài)性研究當(dāng)中，一般將群體常見的DNA序列稱之為野生型（wild-type）等位

2、基因，將少見的DNA序列稱之為變異型（variant-type）等位基因?；蚨鄳B(tài)性可存在于人類基因組的任何區(qū)域，位于內(nèi)含子區(qū)域的基因多態(tài)性不影響轉(zhuǎn)錄，對(duì)蛋白的結(jié)構(gòu)和功能也不造成影響；位于基因啟動(dòng)子和調(diào)控區(qū)域的多態(tài)性基因可能影響到基因的轉(zhuǎn)錄水平，而位于外顯子內(nèi)的基因多態(tài)性則直接影響到蛋白質(zhì)的編碼和功能。 隨著我國(guó)生活水平的提高以及生活和飲食方式的逐漸改變，女性乳腺癌發(fā)病率呈現(xiàn)明顯上升趨勢(shì)。據(jù)上海市疾病控制中心新近惡性腫瘤統(tǒng)計(jì)資料

3、顯示，上海地區(qū)乳腺癌發(fā)病率與死亡率均居女性常見惡性腫瘤的第一位。 目的： 本研究以檢測(cè)乳腺癌組織轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達(dá)，探討乳腺癌中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達(dá)與臨床分期、病理組織學(xué)分級(jí)及其預(yù)后等參數(shù)的關(guān)系；并從基因多態(tài)性水平測(cè)定乳腺癌組織中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4基因多態(tài)性的改變，探討其在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院普通外科手術(shù)切除的乳腺癌病例，有完整的臨床病理資料共65

4、例,以鼠抗人E2F-4單克隆抗體為一抗檢測(cè)其在乳腺癌組織中的表達(dá)情況，以此評(píng)估其在乳腺癌發(fā)展中的作用。應(yīng)用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增后采用直接測(cè)序的方法，檢測(cè)乳腺癌組織中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4基因多態(tài)性的變化。 結(jié)果： 1. 研究組乳腺癌組織中轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的表達(dá)顯著高于對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.05）；E2F-4的表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移、TNM臨床分期、組織學(xué)分級(jí)以及預(yù)后在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著相關(guān)（P均＜0.05）；乳腺癌的病理

5、學(xué)類型也與E2F-4的表達(dá)有關(guān)，導(dǎo)管癌和粘液癌的表達(dá)強(qiáng)于小葉癌及髓樣癌（P＜0.05）；術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)者E2F-4表達(dá)強(qiáng)度高于術(shù)后長(zhǎng)期無(wú)轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)者（P＜0.05）；但與年齡、大小、ER、PR和c-erb-B2無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的顯著相關(guān)性（P＞0.05）； 2. 乳腺癌E2F－4基因（AGC）多態(tài)性變異與正常人群有差異（P＜0.05）,20例乳腺癌與配對(duì)癌旁組織(AGC)重復(fù)數(shù)均相同，未發(fā)現(xiàn)腫瘤組織存在（AGC）n數(shù)目改變的體細(xì)胞突

6、變（somatic mutation）。 結(jié)論： 1. 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4的功能涉及細(xì)胞的增值、分化、凋亡，其轉(zhuǎn)錄活性的增強(qiáng)有利于促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增值與分化并導(dǎo)致患者較差的預(yù)后，故轉(zhuǎn)錄因子E2F-4對(duì)于判斷患者的預(yù)后具有重要的價(jià)值，其可能是評(píng)判乳腺癌惡性程度、轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)和預(yù)后的較好指標(biāo)； 2. 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4作為腫瘤的相關(guān)基因，在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著癌基因的作用，而不是抑癌基因的表現(xiàn)。 3. 轉(zhuǎn)錄因子