組織因子途徑物-2（TFPI-2）與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：組織因子途徑抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2，TFPI-2)是一種帶有Kunitz型結(jié)構(gòu)域的蛋白酶抑制劑，屬于絲氨酸蛋白酶抑制物超家族成員。又稱胎盤蛋白-5或基質(zhì)相關(guān)性絲氨酸蛋白酶抑制劑。它可能通過(guò)影響細(xì)胞外基質(zhì)的重塑參與組織發(fā)生、胚胎發(fā)育分化、傷口愈合和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂等生理過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)：TFPI-2的表達(dá)下降與膠質(zhì)瘤、纖維肉瘤和卵巢癌的遠(yuǎn)處侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)，但與乳腺癌的關(guān)系尚無(wú)定

2、論，目前仍是研究的熱點(diǎn)。 方法：為研究TFPI-2在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用，本研究收集了從2004年6月到2006年8月行手術(shù)切除乳腺腫塊的標(biāo)本，共83例；其中62例為乳腺癌標(biāo)本，21例為良性腫塊。將62例乳腺癌標(biāo)本根據(jù)病理學(xué)pTNM分期分為四組。用免疫組化的方法檢測(cè)了腫瘤標(biāo)本中TFPI-2的相對(duì)量。為進(jìn)一步驗(yàn)證TFPI-2對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響，我們與復(fù)旦大學(xué)分子醫(yī)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室合作，取得了在惡性乳腺癌細(xì)胞系M

3、DA-MB-435中穩(wěn)定高表達(dá)TFPI-2的細(xì)胞株和對(duì)照空白轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株。將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的兩株細(xì)胞接種于裸鼠皮下脂肪墊，動(dòng)態(tài)觀察腫瘤生長(zhǎng)，對(duì)腫瘤原位組織和肝、腦、肺等組織進(jìn)行了病理切片分析。 結(jié)果：在乳腺腫瘤病理標(biāo)本的免疫組化檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)隨著惡性程度的增高，TFPI-2的表達(dá)下降；單因素方差分析統(tǒng)計(jì)比較發(fā)現(xiàn)良性腫塊中TFPI-2的表達(dá)水平明顯高于惡性腫瘤，而惡性程度最高的Ⅳ組，TFPI-2表達(dá)很弱，明顯低于其他組(P<0.05)

4、統(tǒng)計(jì)分析有顯著差異；進(jìn)一步分析TFPI-2的表達(dá)量與乳腺癌的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)TFPI-2與乳腺癌惡性程度呈負(fù)相關(guān)，r<,s0.01>=-0.41，P<0.01；即隨著乳腺癌惡性程度的增高，TFPI-2的表達(dá)量隨之下降。在裸鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù)顯示雖然不同組腫瘤的生長(zhǎng)速度不同，病理切片顯示TFPI-2可以抑制乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435對(duì)腫瘤周圍結(jié)締組織的浸潤(rùn)、破壞。但兩組腫瘤的生長(zhǎng)速度和成瘤體積無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)在乳腺

5、癌細(xì)胞中TFPI-2的表達(dá)量明顯低于乳腺良性腫瘤，TFPI-2的表達(dá)量與乳腺癌惡性程度的上升呈負(fù)相關(guān)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)惡性程度高的乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435穩(wěn)定高表達(dá)TFPI-2后，局部成瘤的速度和四周后腫瘤的重量與空白轉(zhuǎn)染對(duì)照組相比有下降趨勢(shì)，但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而病理切片發(fā)現(xiàn)腫瘤對(duì)局部結(jié)締組織的侵襲破壞能力明顯減弱。上述研究結(jié)果說(shuō)明TFPI-2可能作為一種抑癌因子而發(fā)揮作用，其表達(dá)下降與乳腺癌惡性程度的增高和侵襲能力增加有一定關(guān)系。