杜仲葉醇提取物的抗動脈粥樣硬化作用及機(jī)制研究.pdf

1、, 目的：通過建立動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)動物模型，探討杜仲葉醇提取物(AlcoholextractiveofFoliumEucommiae，AEFE)的抗AS作用及可能的作用機(jī)制。 方法：高脂飲食加維生素D3(總量60萬u／kg,分3天腹腔注射)建立大鼠AS模型。雄性SD大鼠分為6組：①正常對照組(N)：普通飼料；②模型組(M)：高脂飼料；③AEFE小劑量治療組(AL)：高脂飼料+AEFE70

2、mg．kg～·d一；④AEFE中劑量治療組(AM)：高脂飼料+AEFE140mg．kg'1．d-1；⑤AEFE大劑量治療組(AH)：高脂飼料+AEFE420mg．kg'1．d-1；⑥陽性對照藥洛伐他汀組(L)：高脂飼料+洛伐他汀(Lovastatin，L)4mg．kg'l·d一。治療藥物在飼高脂飼料2周后開始灌胃給予，共給藥6周。造模8周后進(jìn)行大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力測定；光鏡下觀察主動脈、心臟和肝臟的病理改變；生化方法測定血漿脂質(zhì)(TC、

3、TG、HDL、LDL和ApoB／ApoAI)、一氧化氮(nitrixoxide，NO)和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)活性；放射免疫法測定血漿中內(nèi)皮素一1(Endothelin一1，ET-1)、血栓素B2(thromboxaneB2，TXB2)和6一酮-前列腺素Flα(6-keto-prostaglandinF1α，6-K-PGFlα)的含量；免疫

4、組織化學(xué)法檢測細(xì)胞間粘附分子一l(intercellularadhesionmolecule一1，ICAM-1)和腫瘤壞死因子一α(tumournecrosisfactor-0t，TNF—α)在主動脈及心臟的表達(dá)情況。 取家兔主動脈制成血管條片，置于恒溫平滑肌槽中通過張力換能器記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。血管條分為有內(nèi)皮和去內(nèi)皮組，用去氧腎上腺素(Phenylephrine，Phe)和氯化鉀(KCl)預(yù)收縮血管條后加入AEFE，并分別給予一氧

5、化氮合酶(Nitricoxidesynthase，NOS)抑制劑左旋硝基精氨酸(L-N-Nitro-arginine，L-NNA)、前列腺素合成酶抑制劑吲哚美辛(Indometacin，Indo)及p受體阻斷劑普萘洛爾(Propranolol，Prop)觀察對AEFE效應(yīng)的影響。 結(jié)果：各組大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力無明顯差別。HE染色可見模型組大鼠血管壁增厚，內(nèi)皮細(xì)胞呈連續(xù)性缺失，內(nèi)皮下間隙增寬，平滑肌細(xì)胞增生，排列紊亂，泡沫細(xì)胞

6、堆積和鈣質(zhì)沉著，冠狀動脈可見AS斑塊不規(guī)則突出于管腔，脂肪變性的肝細(xì)胞彌漫累及所有肝小葉；AL組病理改變基本同模型組；AM、AH和L組病理改變較模型組明顯減輕。模型組大鼠血漿TC、TG、LDL和ApoB／ApoAI較正常組明顯升高而HDL明顯降低；AEFE各劑量組及L組與模型組相比TC、TG、LDL和ApoB／ApoAI明顯降低、HDL升高。與正常組相比模型組血漿MDA濃度明顯升高而SOD活性明顯降低；與模型組相比，AEFE及L可顯著降

7、低血漿中MDA濃度并升高SOD活性，其中AM、AH和L組SOD活性升高的更為明顯。與正常組相比模型組血漿NO、ET-1、6-Keto-PGFlα濃度均明顯降低，而AM、AH和L組血漿N0、ET-1、6-Keto-PGFla濃度較模型組明顯升高；模型組和各用藥組血漿TXB2濃度與正常組相比均升高，AEFE各劑量組與模型組相比無差異。AEFE能夠下調(diào)AS模型大鼠主動脈壁及心臟ICAM-l蛋白的表達(dá)，而不影響動脈壁和心臟TNF-Ig蛋白的表達(dá)

8、。 離體實(shí)驗(yàn)表明AEFE可使Phe預(yù)收縮的動脈條明顯舒張，且具劑量依賴關(guān)系(r=0．997，p<0．01)，AEFE的半抑制濃度(IC50)為16．26mg／ml。去內(nèi)皮和L-NNA可減弱AEFE的血管舒張作用，Indo則無明顯影響。Prop使小劑量的AEFE呈現(xiàn)收縮作用(此收縮作用可被哌唑嗪阻斷)，大劑量才表現(xiàn)舒張效應(yīng)。 結(jié)論：AEFE可以通過調(diào)節(jié)血脂代謝紊亂、抗氧化損傷、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞及抑制ICAM一1蛋白的表達(dá)等