海帶多途徑抗動(dòng)脈粥樣硬化作用機(jī)制研究.pdf

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展以及人類生活方式的轉(zhuǎn)變，心腦血管疾病已經(jīng)成為危害人類健康的首位殺手，而動(dòng)脈粥樣硬化是誘發(fā)心腦血管疾病的主要原因，因此，目前抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物或保健品的篩選是研究的熱點(diǎn)。由于化學(xué)合成藥物存在著不良反應(yīng)明顯等缺點(diǎn)，從中藥或藥食同源植物中篩選抗動(dòng)脈粥樣硬化活性成分逐漸引起人們的關(guān)注。海帶具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，海帶具有一定的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，但海帶中各成分在抗動(dòng)脈粥樣硬化中所起的作用尚未見(jiàn)系統(tǒng)的研究報(bào)道。本

2、課題以海帶為研究對(duì)象，在對(duì)其主要成分多糖、多酚、不飽和脂肪酸的提取、分離、純化的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究了海帶各成分的主要生物活性，從不同角度探究海帶多途徑發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的機(jī)制。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　設(shè)計(jì)了海帶綜合提取方案，按海帶各成分極性的不同，選擇合適的溶劑順次提取其中的不飽和脂肪酸、多酚和多糖，并對(duì)海帶多酚和多糖的提取、分離和純化做了進(jìn)一步的研究。
　　以海帶總多酚提取率為指標(biāo)，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)并結(jié)合正交設(shè)計(jì)，

3、得到了超聲提取海帶多酚的最優(yōu)工藝參數(shù)。結(jié)果表明:采用料液比1∶15(g/mL)，提取溫度30℃、溶劑乙醇濃度70％，提取時(shí)間40 min，此時(shí)海帶多酚的最佳提取率為2.55％，具有良好的重復(fù)性。利用海帶總多酚中各組分的溶解特性，采用AB-8型大孔樹脂吸附、梯度洗脫的方法對(duì)其進(jìn)行分離和純化，結(jié)合紫外光譜及薄層色譜，將多酚分為了5個(gè)組分，分別為Fr1、Fr2、Fr3、Fr4，F(xiàn)r5。
　　以海帶總多糖提取率為指標(biāo)，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)并結(jié)合

4、正交設(shè)計(jì)，得到了海帶多糖的最佳提取工藝，其參數(shù)為:提取次數(shù)為2次，提取溫度為100℃、料液比為1∶40(g/mL)、提取時(shí)間為1h，在此條件下得到的海帶多糖提取率達(dá)7.24％，且具有良好重復(fù)性。通過(guò)熱水提取、乙醇沉淀后得到的海帶總多糖，在使用木瓜蛋白酶-Sevag法去除蛋白質(zhì)后，利用無(wú)水CaCl2及十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)沉淀法將海帶多糖分為了褐藻酸鈣、褐藻淀粉和褐藻糖膠三個(gè)組份。
　　以動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生機(jī)制為出發(fā)點(diǎn)，對(duì)

5、分離純化出的海帶各組分進(jìn)行了抗氧化、降血脂以及抗炎活性的研究。
　　抗氧化活性主要考察清除DPPH·及·OH的能力和抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力。除褐藻酸鈣及Fr1、Fr2組分外，海帶中其他組份均對(duì)DPPH·及·OH有一定的清除作用，且清除自由基的能力與樣品濃度有一定的量效關(guān)系，其中，海帶總多糖成分的清除DPPH·及·OH能力最強(qiáng)，在濃度為5.0 mg/mL時(shí)，其對(duì)DPPH·以及·OH的清除率可分別達(dá)19.85％和25.93％;利用硫代巴比妥

6、酸(TBARs)法測(cè)定海帶各組分抑制亞油酸氧化程度的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，海帶各組分中，褐藻糖膠的抗亞油酸氧化能力最強(qiáng)，對(duì)亞油酸氧化的抑制率最高達(dá)53.1％且作用時(shí)間持久達(dá)10天以上。
　　以體外結(jié)合?；悄懰徕c能力考察其降血脂能力實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，除褐藻酸鈣及Fr1、Fr2組分外，海帶中其他組份均有一定的體外結(jié)合牛磺膽酸鈉的能力，即具有降血脂的作用，其中以海帶總多糖的降血脂能力最強(qiáng)，其與?；悄懰徕c的結(jié)合率可高達(dá)26.89％。
　　抗炎實(shí)

7、驗(yàn)結(jié)果表明，海帶多糖和不飽和脂肪酸對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)管通透性抑制率分別達(dá)41.39％和16.52％，均表現(xiàn)出一定的抗炎活性，海帶多酚組未檢測(cè)出抗炎活性，且海帶多糖、多酚以及不飽和脂肪酸對(duì)小鼠肝臟中丙二醛(MDA)的產(chǎn)生均具有微弱的抑制能力，抑制率在10％以內(nèi)。
　　綜上所述，海帶中的主要成分多糖、多酚以及不飽和脂肪酸均不同程度得具有一定的抗氧化、降血脂以及抗炎功效，該課題從不同角度解釋了海帶多途徑發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的機(jī)制，為海帶醫(yī)