5-Aza-CdR對人胃癌細胞株生物學(xué)行為及RASSF1AmRNA表達的影響.pdf

1、目的：通過利用特異性甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-氮雜2-脫氧胞苷分別作用于人胃癌細胞系BGC-823、SGC-7901、MKN-28，檢測其增殖，細胞周期，凋亡率的變化，和抑癌基因RASSF1AmRNA的表達。以闡明5-氮雜2-脫氧胞苷對胃癌細胞增殖，細胞周期和凋亡率的影響，及同一抑癌基RASSF1A基因在不同分化程度的胃癌細胞系的表達情況。 方法：體外培養(yǎng)人胃癌細胞系BGC-823、SGC-7901、MKN-28后，分別加入0.4μm

2、ol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L不同濃度的5-Aza-CdR處理24h、48h、72h，用相差顯微鏡動態(tài)觀察藥物處理后的三種胃癌細胞形態(tài)學(xué)改變;MTT比色法測24h、48h、72h時間段的吸光度值，計算增殖抑制率，流式細胞儀檢測5-Aza-CdR對胃癌細胞株生長周期及凋亡的影響，RT-PCR檢測5-Aza-CdR處理前、后抑癌基因RASSF1AmRNA的表達。 結(jié)果：

3、 （1）5-Aza-CdR作用于體外培養(yǎng)人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28后細胞增殖受到明顯抑制，呈時間和濃度依賴性，與對照組相比,差異有顯著性( P< 0.05 )； （2）SGC-7901細胞周期分布發(fā)生變化，G0/G1期細胞數(shù)明顯增多，胃癌細胞阻滯于G0/G1期，6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L濃度組與陰性對照組比較P<0.05，差異有顯著性。MKN-28細胞

4、亦阻滯在G0/G1期，6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L濃度組與陰性對照組比較P<0.05，差異有顯著性。BGC-823生長周期無明顯的變化。 （3）5-Aza-CdR作用SGC-7901細胞24h、48h、72h后，72h各藥物濃度組的凋亡率與陰性對照組比較及組間比較差異均有顯著性( P< 0.05 )，24h、48h各藥物濃度組與陰性對照組比較差異無顯著性( P＞0.05 )。MKN-28細胞7

5、2h后各藥物濃度組與陰性對照組比較差異有顯著性，25.6μmol/L濃度組與102.4μmol/L濃度組及各濃度組（0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L）之間差異有顯著性( P< 0.05 )。24h、48h各藥物濃度組與陰性對照組比較差異無顯著性( P＞0.05 )。BGC-823細胞72h各藥物濃度組的凋亡率與陰性對照組比較及組間比較差異均有顯著性( P< 0.05 )，24h、48h各藥物濃度組與陰性對照組比

6、較差異無顯著性( P＞0.05 )； （4）RT-PCR檢測人胃癌細胞株SGC-7901、MKN-28無RASSF1AmRNA表達，經(jīng)5-Aza-CdR處理后基因重新表達，BGC-823處理前后RASSF1AmRNA均有表達。 結(jié)論： 1、RASSF1A抑癌基因沉默與胃癌的發(fā)生相關(guān)。 2、5-Aza-CdR可以抑制細胞SGC-7901、MKN-28細胞的增殖，改變細胞周期，促進細胞凋亡。 3、5-