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文檔簡(jiǎn)介
1、[目的]:觀察5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對(duì)體外培養(yǎng)的人卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780、OVCAR3生長(zhǎng)的影響及RASSFlA基因甲基化狀態(tài)、在mRNA及蛋白水平表達(dá)的影響。
[方法]:卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780、OVCAR3經(jīng)不同濃度5-氮雜-2,一脫氧胞苷(5-Aza-cdR)處理后,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及免疫印記(WesternBlot)檢測(cè)其在mRNA和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)變化;同時(shí)MTT法觀察
2、卵巢癌細(xì)胞增殖能力的改變,采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)檢測(cè)藥物處理前后的RASSFIA的甲基化狀態(tài)。
[結(jié)果]:人卵巢癌細(xì)胞A2780、OVCAR3經(jīng)藥物處理后,與對(duì)照組比較,5-氮雜-2,一脫氧胞苷0.5、5、50umol/l均能明顯抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),隨5-氮雜-2'一脫氧胞苷濃度增加,細(xì)胞生長(zhǎng)速率下降;對(duì)照組細(xì)胞A2780、OVCAR3均可見(jiàn)RASSFIAmRNA及蛋白水平均有表達(dá),但表達(dá)較弱;經(jīng)藥物處理后的
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