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文檔簡介
1、目的:研究竹蓀多糖提取條件優(yōu)化、自制竹蓀多糖飲料,探討竹蓀多糖飲料對正常大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及竹蓀多糖對砷中毒大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,為竹蓀多糖作為保健品的綜合開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。
方法:1.采用單因素試驗、響應(yīng)面法試驗優(yōu)化竹蓀多糖的提取工藝;2.單因素試驗、正交試驗優(yōu)化竹蓀多糖飲料的調(diào)配工藝;3. Morris水迷宮實驗、避暗實驗和跳臺實驗研究竹蓀多糖飲料對正常大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響;Elisa法檢測正常大鼠海馬及腦組織
2、中BDNF、TrkB、NMDA含量;比色法檢測海馬中Ach、ChAT含量;TBA法檢測血清和腦組織MDA生成量;羥胺法檢測血清和腦組織T-SOD含量;比色法檢測血清和腦組織GSH和GSH-Px含量;4. Morris水迷宮實驗、避暗實驗和跳臺實驗研究竹蓀多糖對砷中毒大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響;電鏡觀察大鼠海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu);Elisa法、比色法、TBA法、羥胺法檢測砷中毒大鼠海馬、腦組織及血清BDNF、TrkB、NMDA、Ach、ChAT、MD
3、A、T-SOD、GSH和GSH-Px含量。
結(jié)果:1.響應(yīng)面法優(yōu)化竹蓀多糖最佳提取條件:提取溫度82℃,提取時間3.1h,液料比62:1ml/g,此條件下提取1次,多糖提取率為13.016%,接近模型預(yù)測理論值13.040%;2.自制竹蓀多糖飲料最佳口感配方:竹蓀多糖0.6%、白砂糖7%、檸檬酸0.9%、檸檬酸鈉0.02%;飲料中蛋白質(zhì)含量:0.3%;脂肪:0.7%;總糖:7.3%。3.竹蓀多糖飲料對正常大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
4、結(jié)果:Morris水迷宮實驗:竹蓀多糖飲料能夠縮短正常大鼠找到平臺的逃避潛伏期,并且增加大鼠跨越平臺次數(shù);避暗實驗:竹蓀多糖飲料能夠延長正常大鼠進(jìn)入暗箱的潛伏期,減少進(jìn)入暗箱的錯誤次數(shù);跳臺實驗:竹蓀多糖飲料能夠延長正常大鼠跳下平臺的潛伏期,減少跳下平臺的錯誤次數(shù);海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)無明顯變化;海馬組織指標(biāo)檢測結(jié)果:與正常對照組相比,竹蓀多糖飲料4周組和8周組海馬BDNF、TRKB含量明顯增高,差異具有顯著性(P<0.05);竹蓀多糖飲料4
5、周組海馬NMDA含量顯著增高;8周組海馬組織BDNF顯著增高,差異具有顯著性(P<0.05),各組間TRKB、NMDA差異不顯著;竹蓀多糖飲料組Ach高于正常組,差異具有顯著性(P<0.05);4周組及8周組ChAT活力高于正常組,差異具有顯著性(P<0.05);各飲料組血清T-SOD含量均顯著增加(P<0.05);2周組和8周組腦組織GSH活力高于對照組;4周組和8周組血清GSH-Px含量顯著高于對照組(P<0.01);4周組腦組織G
6、SH-Px活力單位高于對照組(P<0.05);4.竹蓀多糖對砷中毒大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響結(jié)果:Morris水迷宮實驗,竹蓀多糖能夠縮短砷中毒大鼠找到平臺的逃避潛伏期,并且增加砷中毒大鼠跨越平臺次數(shù);避暗實驗,竹蓀多糖能夠延長砷中毒大鼠進(jìn)入暗箱的潛伏期,減少進(jìn)入暗箱的錯誤次數(shù);跳臺實驗,竹蓀多糖能夠延長砷中毒大鼠跳下平臺的潛伏期,減少跳下平臺的錯誤次數(shù);竹蓀多糖能夠改善砷中毒大鼠海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu);與砷中毒模型組相比,低、中、高劑量組砷中毒大
7、鼠海馬 BDNF含量均高于模型組(P<0.05);低劑量組和高劑量組海馬TRKB含量高于模型組(P<0.05);高劑量組海馬NMDA含量高于模型組(P<0.05);中劑量組和高劑量組海馬 ChAT活力高于模型組(P<0.05);砷中毒模型組神經(jīng)元細(xì)胞水腫較明顯,細(xì)胞器較少,線粒體結(jié)構(gòu)水腫明顯,隨著多糖劑量的升高,細(xì)胞形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)隨之改善,水腫減輕,包漿細(xì)胞器豐富;抗氧化指標(biāo):高劑量組血清T-SOD高于模型組(P<0.05);中劑量組和高劑
8、量組腦組織T-SOD高于模型組(P<0.01);高劑量組血清MDA低于模型組(P<0.05);高劑量組腦組織GSH高于模型組(P<0.05);高劑量組腦組織GSH-Px活力單位高于模型組(P<0.05)。
結(jié)論:1、竹蓀多糖的最佳提取條件:提取溫度82℃、提取時間3.1h、液料比62:1ml/g,提取1次,竹蓀多糖最佳提取率為13.016%;2、自制竹蓀多糖飲料配方:多糖0.6%、白砂糖7%、檸檬酸0.9%、檸檬酸鈉0.02%
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