CCK對(duì)慢性砷中毒大鼠初級(jí)感覺(jué)傳入影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：復(fù)制慢性砷中毒大鼠模型,研究CCK對(duì)慢性砷中毒大鼠初級(jí)感覺(jué)傳入的影響作用,初步探討其作用機(jī)制,為臨床慢性砷中毒的機(jī)制研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),并尋求治療慢性砷中毒的有效藥物。 方法： 1、創(chuàng)建胎鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的培養(yǎng)方法,并進(jìn)行神經(jīng)元特異性的染色鑒定。 2、復(fù)制慢性砷中毒模型,行為學(xué)檢測(cè)模型復(fù)制成功后讓其受孕,培養(yǎng)孕16-18 d的胎鼠的DRG神經(jīng)元,培養(yǎng)前用CCK進(jìn)行預(yù)處理,觀(guān)察CCK對(duì)培養(yǎng)DRG神經(jīng)元生長(zhǎng)時(shí)間

2、的影響。 3、免疫組織化學(xué)檢測(cè)CCK在砷中毒大鼠背根神經(jīng)節(jié)的表達(dá),并檢測(cè)CCK陽(yáng)性表達(dá)光密度半定量均值。 4、電生理學(xué)技術(shù)測(cè)定不同程度砷中毒大鼠坐骨神經(jīng)復(fù)合動(dòng)作電位和傳導(dǎo)速度,給予CCK孵育后觀(guān)察CCK對(duì)砷中毒大鼠坐骨神經(jīng)復(fù)合動(dòng)作電位和傳導(dǎo)速度的影響。 結(jié)果： 1、培養(yǎng)出了DRG神經(jīng)元細(xì)胞,神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)染色鑒定細(xì)胞陽(yáng)性。 2、CCK預(yù)處理后,LD組DRG神經(jīng)元細(xì)胞的存活時(shí)間平均從

3、原來(lái)的154±3 h延長(zhǎng)到186±4h,MD組DRG神經(jīng)元細(xì)胞的存活時(shí)間平均從原來(lái)的79±4 h延長(zhǎng)到114±2 h。CCK對(duì)HD組神經(jīng)元細(xì)胞存活時(shí)間的影響無(wú)顯著性差異。 3、CCK在慢性砷中毒大鼠背根神經(jīng)節(jié)上的表達(dá)與正常對(duì)照組相比有所增強(qiáng)。NC組、LD組、MD組和HD組測(cè)得CCK表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞的半定量光密度均值分別是0.163±0.002、0.196±0.003、0.274±0.011、0.201±0.004,以MD組反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)

4、胞的半定量光密度均值最高。 4、和對(duì)照組相比,隨著砷中毒程度的增加,三個(gè)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)作電位的幅值及傳導(dǎo)速度呈下降趨勢(shì)。LD組和MD組應(yīng)用CCK以后,動(dòng)作電位的幅值及傳導(dǎo)速度有所恢復(fù),但HD組在應(yīng)用CCK后,動(dòng)作電位的幅值及傳導(dǎo)速度幾乎沒(méi)有影響。 結(jié)論： 1、慢性砷中毒胎鼠DRG神經(jīng)元與對(duì)照組DRG神經(jīng)元相比存活時(shí)間有所縮短。 2、CCK可使慢性輕、中度砷中毒胎鼠的DRG神經(jīng)元的存活時(shí)間延長(zhǎng),對(duì)神經(jīng)元起到一定的