白眉蝮蛇蛇毒類凝血酶的分離純化及酶學表征.pdf

1、蛇毒類凝血酶屬于蛇毒絲氨酸蛋白酶家族。它可以將纖維蛋白原轉化為纖維蛋白。 由它所產生的纖維蛋白側鏈不發(fā)生交聯，容易被纖溶系統(tǒng)所降解，所以它具有降低血液粘度的功能。也因此類凝血酶在血栓的防治，心肌梗死方面有很廣泛的應用。本實驗運用陽離子交換，凝膠過濾和陰離子交換層析技術從長白山白眉蝮蛇蛇毒中分離出兩種具有纖維蛋白原降解活性的酶：酶Ⅰ和酶Ⅱ。兩種酶都具有精氨酸酯酶活性和纖維蛋白原凝結活性。這兩種酶的精氨酸酯酶活性可被苯甲基磺酰氟(P

2、MSF)，苯甲脒(Benzamidine)和L-苯甲磺酰苯丙氨酰氯甲酮(TPCK)所抑制，而不被乙二胺四乙酸(EDTA)抑制。酶Ⅰ可釋放少量的血纖肽A，不釋放血纖肽B。而酶Ⅱ除釋放血纖肽A外，還釋放少量血纖肽B。在與纖維蛋白原降解實驗中發(fā)現，酶Ⅰ和酶Ⅱ都能首先降解纖維蛋白原a鏈，后降解纖維蛋白原B鏈，酶Ⅰ降解纖維蛋白原的速度比酶Ⅱ快。酶Ⅱ在與纖維蛋白原共浴24小時后發(fā)現其能降解γ鏈。SDS-PAGE電泳顯示兩種酶都為單肽鏈，酶Ⅰ和酶Ⅱ的