2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、江南大學碩士學位論文脫枝酶的分離純化及酶學性質研究姓名：李由然申請學位級別：碩士專業(yè)：發(fā)酵工程指導教師：石貴陽20090601AbstractAbstractBacillusspwasisolatedfromahighwaysoilsampleinQingdaobyresearcherZhaoXianchunofCentreofBiomassResourceofSchoolofBiotechnologyJiangnanUniversit

2、yDuetoitsrelativelyhighStarchDebranchingenzyme(DBE)activitythisstrainCallbeappliedinfactoriesasanewsourcetosynthesisDBEForthepurposeofimprovingtheactivityandstabilityofDBEproducedbythestrainabove，wepurifiedDBEfromBacillu

3、sspandstudieditsbasicpropertiesPurifiedstrainWasinoculatedintoinductionmediumandculturedunder37℃on180rpmshakingtablefor36hThestrainBacillusspCBB272withhighestDBEactivitywaschosenasstartstrainaftersecondaryscreeningRejuve

4、natethestrain272byaserialpassagestilltheactivityreachedastablelevelAfter11passages，theDBEactivityincreasedby128timesPreparingcrudeenzymein15LcomputercontrolledfermentorPurifiedstrainoftwostepculturing，lasting24hand12hres

5、pectively，Wasaddedinto9Lmediumwithaninoculationamountof10％After36hfermentationat37“C，the9LproductWasconcentratedto16LcrudeenzymewithaproteinamOuntof13mg／mLbycentrifugeandultrafiltrationThetargetproteinWasprecipitationbet

6、ween30％80％ammoniumsulfatesaturationandthesedimentwasredissolvedin20mMTrisHCIbuffer(pH82)TheproteinsolutionWasrunthroughSephacrylS100gelfiltration，DEAEFFionexchangecolumeandMonoQionexchangecolumnThefinalproteinsolutionWas

7、verifiedonSDSPAGEwithoneband，whichprovedthattheenzymeWaspurifiedtohomogeneityTheproteinconcentrationandDBEactivityweremeasuredaftereachstepofpurificationandthespecificactivityfoldandyieldofeachstepWascalculatedIntheend，a

8、36921foldpurification州thayieldof192％WasobtainedProteinconcentrationWasmeasuredintermsofBradfordmethodusingBSAasthestandard；DBEactivityWasmeasuredbyIodinemethodThebasicpropertiesofDBEWasstudied111emaximalactivityoccurreda

9、t70“12andpH60ItWasstableatatemperaturebetween30℃and70℃andretainedatleast70％originalactivityfor60mininthepHrangefrom45—90AtpH60and50“Cthe‰for支鏈淀粉Was40324mg／mLandthegmaxWasO1841mg／(minmLdebranchingenzyme)TleenzymeWasactiva

10、tedstronglybyCa2，M92andMn2(upto14131％)，whatismore，C一，Wasshowntobeanexcellentprotectoroftheenzymeatatemperatureupto80℃ThehomogenousStarchDebranchingEnzymeanditsbasicpropertieswereobtainedthroughthisstudywhichlaidafoundati

11、onforthefuturestudyofDBEaminoacidsequenceandtherelationshipofDBEstructure&functionAccordinglywecanincreasetheoutputandqualityofDBEbymodifyingtheenzymetoenhanceitsactivityandstabilityKeywords：StarchDebranchingEnzyme；Bacil

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