國內(nèi)5種市售微生態(tài)制劑益生菌株的粘附性能研究.pdf

1、益生菌是指可以改善宿主腸道微生態(tài)平衡，并且含有生理性的活菌的微生物，益生菌作用的好壞取決于菌種的選擇。 粘附是微生物與宿主腸道相互作用的第一步，也是進(jìn)入腸道的微生物發(fā)揮作用的前提。益生菌必須粘附于宿主腸道，才能與正常菌群一起構(gòu)成生物屏障，通過定植保護(hù)作用影響過路菌或者外襲菌的定植、占位和繁殖，并且，益生菌還可以在宿主體內(nèi)產(chǎn)生生物酶、活性肽以及一些代謝產(chǎn)物如有機(jī)酸、過氧化氫、細(xì)菌素等物質(zhì)可以阻止或殺死致病菌在體內(nèi)的定植，發(fā)揮化學(xué)屏

2、障作用，因此，益生菌的粘附性能就成為益生菌菌株質(zhì)量評(píng)定的重要指標(biāo)之一。目前國內(nèi)外的微生態(tài)制劑品種比較多，但是對(duì)這些制劑中益生菌的粘附性能方面的系統(tǒng)檢測資料尚比較缺乏。 本課題擬對(duì)目前我國國內(nèi)市售的5種微生態(tài)制劑中10株益生菌的粘附性能進(jìn)行系統(tǒng)檢測，從而為其作用基礎(chǔ)提供實(shí)驗(yàn)資料。 方法：(1)采用革蘭氏染色法，檢測益生菌對(duì)體外培養(yǎng)的HT-29細(xì)胞的粘附能力。(2)益生菌與辣根過氧化物酶標(biāo)記的粘蛋白共孵育后，DAB顯色，即采

3、用ELISA法測定492nm的OD值反映益生菌對(duì)粘蛋白的粘附能力。(3)益生菌和致病菌一起與細(xì)胞共孵育后，蒸餾水裂解細(xì)胞釋放粘附其上的細(xì)菌，利用致病菌的選擇性培養(yǎng)基計(jì)數(shù)，反映致病菌的粘附率的方法檢測了10株益生菌對(duì)致病性大腸桿菌(EPEC)的粘附抑制性能，體外檢測了益生菌對(duì)致病菌的拮抗作用。 結(jié)果：(1)3種方法的綜合評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，在所檢測的10株益生菌中，其粘附性能的綜合排序?yàn)榻痣p歧的長雙歧桿菌(J.BL)、麗株腸樂的青春雙歧

4、桿菌(L.BL)、金雙歧的保加利亞乳桿菌(J.LB)、培菲康的嗜酸乳桿菌(P.LA)、培菲康的長雙歧桿菌(P.BL)、培菲康的糞腸球菌(P.EC)、媽咪愛的屎腸球菌(M.EC)、媽咪愛的枯草芽孢桿菌(M.yb)、整腸生的地衣芽孢桿菌(Z.yb)、金雙歧的嗜熱鏈球菌(J.EC)。 (2)從不同菌屬的益生菌的粘附性能來看，雙歧桿菌的粘附性能最好、乳桿菌其次、腸球菌一般、芽孢桿菌最弱。 (3)不同的實(shí)驗(yàn)方法檢測到的10株益生菌

5、的粘附性能排序之間有差異。a.就革蘭氏染色法而言，10株菌的粘附性能的排序?yàn)榻痣p歧的長雙歧桿菌(J.BL)、麗株腸樂的青春雙歧桿菌(L.BL)、培菲康的嗜酸乳桿菌(P.LA)、金雙歧的保加利亞乳桿菌(J.LB)、培菲康的長雙歧桿菌(P.BL)、培菲康的糞腸球菌(P.EC)、媽咪愛的屎腸球菌(M.EC)、金雙歧的嗜熱鏈球菌(J.EC)、媽咪愛的枯草芽孢桿菌(M.yb)、整腸生的地衣芽孢桿菌(Z.yb)，與綜合評(píng)價(jià)結(jié)果基本一致，僅僅是兩株乳

6、桿菌P.LA、J.LB和J.EC排序出現(xiàn)差異. b.ELISA法排序結(jié)果為：麗株腸樂的青春雙歧桿菌(L.BL)、金雙歧的長雙歧桿菌(J.BL)、培菲康的長雙歧桿菌(P.BL)、培菲康的嗜酸乳桿菌(P.LA)、培菲康的糞腸球菌(P.EC)、金雙歧的保加利亞乳桿菌(J.LB)、金雙歧的嗜熱鏈球菌(J.EC)、媽咪愛的屎腸球菌(M.EC)、媽咪愛的枯草芽孢桿菌(M.yb)、整腸生的地衣芽孢桿菌(Z.yb)，P.BL對(duì)粘蛋白的粘附性能高

7、于了兩株乳桿菌，J.EC也表現(xiàn)出與粘蛋白的強(qiáng)粘附性，而J.LB對(duì)粘蛋白的粘附性能較之綜合評(píng)定排序置后； c.對(duì)EPEC的粘附抑制結(jié)果排序?yàn)椋航痣p歧的保加利亞乳桿菌(J.LB)、培菲康的長雙歧桿菌(P.BL)、金雙歧的長雙歧桿菌(J.BL)、媽咪愛的屎腸球菌(M.EC)、麗株腸樂的青春雙歧桿菌(L.BL)、培菲康的糞腸球菌(P.EC)、培菲康的嗜酸乳桿菌(P.LA)、媽咪愛的枯草芽孢桿菌(M.yb)、整腸生的地衣芽孢桿菌(Z.yb