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文檔簡(jiǎn)介
1、肉質(zhì)性狀,尤其是肌內(nèi)脂含量的改良是近階段豬育種工作的主要目標(biāo)之一。不同豬種尤其是中國(guó)地方豬種與外國(guó)引進(jìn)豬種在肉質(zhì)性狀和肌內(nèi)脂含量上表現(xiàn)著極大的差異。本研究通過(guò)差異顯示逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(DDRT-PCR)的方法鑒定在肌內(nèi)脂肪含量差異極顯著的個(gè)體間背最長(zhǎng)肌差異表達(dá)的基因,旨在尋找參與肌內(nèi)脂肪沉積調(diào)控的相關(guān)基因,并為豬的肌內(nèi)脂肪性狀選育提供理論依據(jù)和技術(shù)支持,
從20頭180日齡蘇淮白豬中分別選取肌內(nèi)脂肪含量最高和最低各5個(gè)
2、個(gè)體組成兩組,其平均肌內(nèi)脂肪含量分別為H組(3.251%±0.327%)和L組(1.469%±0.119%),組間差異極顯著(p<0.01)。采用3條錨定引物,15條隨機(jī)引物組合進(jìn)行DDRT-PCR,獲得差異表達(dá)條帶并測(cè)序,通過(guò)NCBI比對(duì)發(fā)現(xiàn)其中3條差異序列與已知基因高度同源。分別命名為clonel(233bp),clone2(518bp),clone3(562bp)。其中clonel與分選連接蛋白SNX17高度同源,同源性為99%,
3、登錄號(hào)為NM014748;clone2與人類(lèi)剪切因子精氨酸-絲氨酸富集蛋白SFRS18有高度同源性,同源性為97%,登錄號(hào)為NM015491;clone3與人的肌凝蛋白重鏈MYH4有高度同源性,同源性別為89%,登錄號(hào)為NM017533.
通過(guò)RT-PCR相對(duì)定量驗(yàn)證H組、L組上述三個(gè)基因是否假陽(yáng)性。SNX17基因與SFRS18基因均驗(yàn)證了DDRT-PCR非假陽(yáng)性,SNX17基因在高肌內(nèi)脂含量組中的表達(dá)強(qiáng)于低含量組,SFR
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