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文檔簡介
1、目的:研究絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(PMOP)大鼠骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)增殖分化能力的變化,研究雌激素及雷諾昔芬對正常及PMOP大鼠BMSCs增殖分化能力的影響。 方法:1.去除3月齡健康SD大鼠雙側(cè)卵巢建立PMOP模型,隨機選取部分大鼠于建模一周后服用雌激素或雷諾昔芬,以明確兩種藥物防止PMOP的作用。實驗分組為卵巢切除術(shù)組(OVX)、假手術(shù)組(Sham)、卵巢切除加雌激素治療組(OVX+E2)、卵巢切除加雷諾昔芬治療組(OVX+
2、Ralo),每組8只大鼠。2.手術(shù)后8周SD大鼠建模結(jié)束,并結(jié)束用藥。通過體重、骨密度測量、血清生化檢測及組織學觀察對動物模型進行評價,并觀察藥物對機體的影響。3.同時無菌條件下取OVX組及Sham組大鼠的股骨脛骨,以獲得BMSCs;培養(yǎng)兩種來源的BMSCs,取生長良好的第3代、第4代BMSCs進行對比實驗。以MTT法檢測兩種來源的BMSCs增殖的差異,以酶聯(lián)免疫法檢測成骨指標堿性磷酸酶(ALP)合成量的差異,同時觀察傳代對它們增殖分化
3、能力的影響。4.以兩種濃度的雌激素及雷諾昔芬作用于兩種來源的BMSCs,觀察二者對正常及PMOP大鼠BMSCs增殖分化的影響。 結(jié)果:1.OVX組大鼠的全身BMD值顯著低于其余三組(P<0.01),血清BGP濃度顯著高于其它三組(P<0.01或P<0.05);而OVX+E2組,OVX+Ralo組大鼠血清中BGP濃度與Sham組間無顯著差異(P>0.05)。股骨組織切片顯示OVX組大鼠骨小梁排列稀疏,骨髓腔連接成片,腔內(nèi)空虛或空泡
4、增多;而OVX+E2組,OVX+Ralo組幾乎與Sham組一樣骨小梁粗壯、飽滿,形態(tài)結(jié)構(gòu)完整,連接成網(wǎng)狀。2.Sham組的BMSCs增殖緩慢,其ALP合成量顯著低于OVX組。第4代Sham組的BMSCs比第3代增殖緩慢;相反,傳代后OVX組BMSCs的增殖卻加快;但傳代后各組ALP合成量無明顯變化。3.雌激素可促進第3代BMSCs的ALP合成增加,有促進OVX組BMSCs增殖的趨勢。雷諾昔芬可促進第4代BMSCs的增殖,雷諾昔芬可促進O
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