新型納米微囊復合體介導大鼠肝靶向基因轉染體外及體內的實驗研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩100頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、該實驗設計納米微囊-報告基因復合體,體內外轉染大鼠肝細胞,探索其應用于臨床肝靶向基因治療可行性.該試驗分別利用納米微囊(Nanosphere)包裹Luciferase報告基因,作為基因治療的肝靶向載體,以提高肝靶向載體的表達效價,并對合成的載體進行了體內外的初步生物評價.目的:探討納米微囊載體應用于大鼠體外及體內基因治療的可行性,安全性、轉基因表達水平、轉染效率、轉移方法并與質粒DNA進行比較.方法:以熒光素酶(luciferase,V

2、R1255)、綠色熒光蛋白(EGFP)為目的基因,分別利用納米微囊PEI(聚已烯亞胺),Chitosan(殼聚糖)自組裝成納米微囊復合體,檢測其物理化學特性,體外轉染肝癌細胞系HepG2,Hep3B,Huh-7及原代大鼠肝細胞(Hepatocyte),Kupffer細胞,內皮細胞,轉染48小時后檢測細胞轉基因表達水平,流式細胞儀檢測綠色熒光蛋白表達轉染效率,MTT法檢測對轉基因細胞的毒性.體內通過門靜脈、膽管及尾靜脈灌注,檢測3、7、1

3、4天大鼠肝臟轉基因表達水平,不同肝葉轉基因表達分布,不同組織器官的轉基因表達水平;肝功能檢測納米微囊復合體對肝細胞的毒性;流式細胞儀檢測體內轉染效率;膽管灌注納米微囊包裹Cy5標記的質粒DNA,通過共聚焦顯微鏡觀察納米微囊復合體在體內的分布,及細胞特異性內吞,PCR及RT-PCR,檢測一月后的轉基因大鼠DNA及RNA的表達水平.應用特異性KC清除劑如脂質體包裹的二氯亞甲基二磷酸鹽及氯化釓(gadolinium chloride,GdC1

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論