自制脂質(zhì)納米泡用于體內(nèi)外超聲造影顯像及介導(dǎo)細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染的實驗研究.pdf

1、第一部分自制陽離子納米泡介導(dǎo)HepG2細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染的實驗研究
　　目的:觀察自制陽離子納米泡作為基因轉(zhuǎn)染載體體外轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞的可行性。
　　方法:將脂質(zhì)體、聚乙烯亞胺(PEI)和全氟丙烷聲震后制得殼膜帶有PEI的陽離子脂質(zhì)體納米泡(PNB),評價其基本特性,用其轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,并輻照超聲,熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白表達(dá)情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞轉(zhuǎn)染率,CCK-8法評估其細(xì)胞活性。
　　結(jié)果:制備的PN

2、B表面帶有正電荷,能夠阻礙質(zhì)粒DNA在電場作用下發(fā)生遷移,且能夠有效地轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率達(dá)30％-45%,輻照超聲后轉(zhuǎn)染效率明顯提高(P<0.05)。
　　結(jié)論:新型陽離子納米泡在體外可作為基因轉(zhuǎn)染載體,有效地攜帶質(zhì)粒DNA并促進(jìn)轉(zhuǎn)染,輻照超聲可使轉(zhuǎn)染效率顯著提高。
　　第二部分自制脂質(zhì)納米泡體內(nèi)外超聲造影顯像實驗研究
　　目的:探討自制脂質(zhì)納米泡體內(nèi)外超聲造影增強顯影效果。
　　方法:通過反相蒸發(fā)法制

3、備脂質(zhì)體并用聲震法制得脂質(zhì)納米泡,對其粒徑大小、形態(tài)、zeta電位等進(jìn)行檢測。將納米泡/常規(guī)造影劑(SonoVue)均分別按照殼膜質(zhì)量濃度和氣泡濃度稀釋成相同濃度后觀察二者的體外顯像效果差異。納米泡/SonoVue用同等氣泡濃度對裸小鼠肝臟及皮下移植瘤行超聲造影成像,對比造影效果。
　　結(jié)果:所制備的納米泡大小均一性好,無明顯聚集,平均粒徑為(424.46±89.32)nm,濃度為(6.0~9.0)×109個/ml。在相同的殼膜質(zhì)

4、量濃度下自制納米泡顯影強度明顯高于SonoVue,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。脂質(zhì)納米泡和SonoVue都能達(dá)到較好的體外顯影效果,各相同氣泡濃度組的納米泡與SonoVue增強顯影強度間差別無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。裸小鼠尾靜脈注射后能夠顯著增強其肝臟和皮下移植瘤顯影,與SonoVue相比達(dá)峰時間延遲,顯影時間顯著延長。
　　結(jié)論:本研究成功制備了納米級超聲微泡造影劑,脂質(zhì)原材料利用率高,在體外及裸鼠肝臟和皮下移植瘤均具