慶大霉素Cla組分的分離提純研究.pdf

1、慶大霉素(gentamicin，GM)是一組結(jié)構(gòu)相近的氨基糖苷類多組分抗生素，以C族復(fù)合物為主，對多種革蘭氏陰性菌和陽性菌有較強(qiáng)的抗菌作用。起主要作用的C族復(fù)合物中C1組份毒副作用小，不易耐藥，但療效不如C2和C1a。而C2和Cla雖療效高但毒性大且易耐藥。目前主要通過發(fā)酵菌種及工藝的調(diào)節(jié)對GM組分進(jìn)行控制。近年來發(fā)現(xiàn)GMC1a組分可作為合成抗菌藥物依替米星的前體藥物，應(yīng)用空間較大，而現(xiàn)有工藝落后，因此需要由GM復(fù)合物中分離出GMC1a

2、組分。 慶大霉素組分檢測方法研究：在確定薄層色譜進(jìn)行分離的基礎(chǔ)上，分別比較了碘蒸汽顯色法和熒光顯色法，并對兩種不同體系的影響因素(如活化時(shí)間、活化溫度、展開劑配比等)進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)熒光法可以分離出更多的小組分，因此更適合于定性檢測。定量檢測的研究分別采用了白度法和比色法。白度法雖然測定結(jié)果誤差較大，但是從另一個(gè)角度提供了解決此類問題的辦法。在將薄層色譜碘蒸汽顯色法與比色法相結(jié)合后，確立了快速準(zhǔn)確測定慶大霉素組分的方法，得到GM標(biāo)

3、準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y=0.00892X—0.02393，r=0.9986，線性范圍為2～100mg/ml，其三組分誤差分別為0.19％、0.27％和3.70％。檢測結(jié)果與藥典法測定的標(biāo)準(zhǔn)含量基本吻合，準(zhǔn)確度高，并確定此方法為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的檢測方法。最后用此方法對慶大霉素樣品進(jìn)行了測定，確定其組分Cla、C2、C1含量分別為32.9％、39.4％和27.7％。 慶大霉素離子交換性能研究：靜態(tài)法研究了慶大霉素及其組分的吸附動(dòng)力學(xué)曲線，樹

4、脂對慶大霉素的吸附在160min左右達(dá)到平衡，交換容量可達(dá)8mmol/g。對慶大霉素C1a、C2、C1組分的交換容量分別為2.55、3.15、2.31mmol/g。慶大霉素的吸附動(dòng)力學(xué)曲線表明，三組分的吸附基本上按濃度比例同步增長。溫度對慶大霉素吸附的影響并不顯著可以忽略。pH8時(shí)慶大霉素及其各組分的離子交換均達(dá)到最大值。當(dāng)pH=9～10的范圍內(nèi)，慶大霉素C1a組分與其他兩組分的吸附能力有明顯差別，利用此差別進(jìn)行解吸實(shí)驗(yàn)。確立了1.5M

5、和2.0M兩個(gè)梯度作為慶大霉素的梯度洗脫濃度。 樹脂合成條件對慶大霉素組分分離的影響：分別對樹脂的物理結(jié)構(gòu)、單體配比、交聯(lián)度、水解條件進(jìn)行了單因素極端情況考察，確定孔對慶大霉素的離子交換作用影響不大，可忽略。存在最適交聯(lián)度，存在最適MMA量。水解條件中對考察指標(biāo)的影響大小為：水解時(shí)間>NaOH濃度>水解溫度。通過單因素實(shí)驗(yàn)確定多因素正交實(shí)驗(yàn)的因素及水平，分別以全交換容量，對慶大霉素的相對交換容量，最后一次解吸液中GM的含量以及C