慶大霉素產(chǎn)生菌發(fā)酵液中抑菌活性小組分ANT-A和ANT-B的初步研究.pdf

1、氨基糖苷類抗生素是目前臨床上常用的抗感染藥物，由于該類抗生素具有抗菌譜廣，療效好，性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì)，在市場(chǎng)上占據(jù)相當(dāng)?shù)姆蓊~。在氨基糖苷類抗生素發(fā)酵過程中產(chǎn)生的各種次要組分，可能是抗菌作用更好而毒副作用更小的潛在的新抗生素。同時(shí)，在研究次要組分的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究微生物的代謝機(jī)制，以及關(guān)鍵酶的基因工程改造等，可探索它們的生物合成機(jī)制。 本文通過對(duì)絳紅色小單孢菌SIPI—A—2020的培養(yǎng)、發(fā)酵和初步提取鑒定，驗(yàn)證了絳紅色小單孢菌SI

2、PI—A—2020為慶大霉素產(chǎn)生菌。再以革蘭氏陽(yáng)性菌枯草芽孢桿菌為篩選模型，對(duì)絳紅色小單孢菌發(fā)酵代謝的次要組分進(jìn)行活性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)ANT—A和ANT—B兩種活性小組分，并對(duì)ANT—A和ANT—B兩種活性小組分進(jìn)行了分離純化的初步研究。ANT—A主要存在于菌絲體中易溶于甲醇。將發(fā)酵液放瓶后直接抽濾，濾餅用甲醇抽提，甲醇抽提液進(jìn)行脫鹽脫色，并進(jìn)一步使用硅膠柱進(jìn)行分配層析，最后通過結(jié)晶沉淀得到純度為96％以上的樣品。該ANT—A組分在DAD—U

3、V檢測(cè)中有特征吸收，通過質(zhì)譜檢測(cè)得到ANT—A的分子量為315，根據(jù)1H—NMR數(shù)據(jù)分析并結(jié)合相關(guān)代謝途徑進(jìn)行分析，初步推測(cè)ANT—A可能為含有不飽和雙鍵的假二糖結(jié)構(gòu)化合物。ANT—B極易溶于水，極性較慶大霉素大，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌以及革蘭氏陰性菌都具有抑菌活性，通過D301大孔弱堿性陰離子交換樹脂脫色，HD-2大孔弱酸陽(yáng)離子交換樹脂吸附層析，0.125％氨水洗脫，并進(jìn)一步使用活性炭脫色，CM羧甲基纖維素樹脂精制等步驟，得到一定純度的樣品，